两种体外细胞毒性检测方法的比较研究.doc

两种体外细胞毒性检测方法的比较研究 《上海生物医学工程》杂志2005年第26卷第4期?205? 两种体外细胞毒性检测方法的比较研究* 黄哲玮孙皎孟爱英 上海交通大学医学院附属第九人民医院/上海生物材料研究测试中心(上海200023) 【摘要】目的比较两种常用的细胞毒性检测方法在医疗器械生物学评价中的相关性.方法分别采 用M,rr比色法和细胞增殖度法,在37条件下,将五种医疗器械/生物材料的浸提液分别与小鼠成纤维细胞 (L一929)接触2天和2,4,7天,比较材料对细胞的毒性影响.结果5种不同的材料浸提液分别表现出不同 程度的细胞毒性反应(0～2级).将MTT比色法与细胞增殖度法(2天)的实验数据进行相关性分析,显示两 者之间具有良好的相关性(R=0.977).结论MTT比色法由于其检测所需的细胞量相对较少,试验步骤相 对简便,检测周期短,因此具有一定的优越性,是个值得推荐的细胞毒性检测方法. 【关键词】体外细胞毒性MTT比色法细胞增殖度法 StudyonComparisonofTwoinVitroCytotoxicityTests HuangZheweiSunJiaoMengAiying ShanghaiJiaoTongUniversity—ShanghaiNo.9people’Shospital ShanghaiBiomaterialsResearchamp;TestCenter 【Abstract】ObjectiveTostudytherelativitybetweentwoinvitrocytotoxicitytestwhichusedinbiologicale— valuationofthemedicaldevice.MethOdTheextractsof5kindsofmedicaldevices/biomaterialswerecontactedwith theL一929cellsfor2daysand2,4,7daysrespectivelyat37bytheMTTassayandproliferationtest,comparedthecy— totoxicreaction.ResultsUndertheconditionofthisstudy,5kindsofmedicaldevices/biomaterialsshowedadifferent gradesofthecytotoxicity(02grades).theresultsofMTFassaycomparedwithitofcellproliferationtest(2days)showed agoodrelativity(R=0.977).Conclusionwhencomparedwiththecellproliferationtest,MTTassayneedlessamount ofthecells,bemoresimpleandshorter,itisworthtoevaluatethereactionofcytotoxicityforthemedicaldevices/bioma— terials. 【Keywords】Invitro;Cytotoxicity;MTTassay;cellproliferationtest 生物医用材料及制品已被大量应用于临床各 个学科.由于这些生物医用材料及制品在应用中都 会与人体的组织和细胞发生直接接触,因此它们不 仅需要有良好的理化性能,而且还必须具备有良好 的生物相容性….保证这些医用生物材料的安全性 问题已越来越受到各国政府的重视.1992年国际 标准化组织发布的ISO10993医疗器械的生物学评 价等系列国际标准_2J,我国在70年代后期开始研究 生物材料和医用装置的生物学评价方法,从而保证 上海市重点学科(特色学科)建设项目资助(T0202) 了我国医用生物材料和医疗器械在研究,生产和临 床使用中的安全性,促进了医用生物材料研究的发 展和水平的提高.在众多的生物相容性试验中,细 胞毒性试验以其简便,快捷,灵敏性高,节省动物等 优点均被列为首选试验项目,作为评价材料毒性的 重要指标. 细胞毒性试验是一种在离体状态下模拟生物体 生长环境,检测生物医用材料及制品或其浸提液对 细胞溶解(细胞死亡),抑制细胞生长和其他毒性作 用的方法.在ISO10993—5:1999中该项试验可分 ? 206?《上海生物医学工程》杂志2005年第26卷第4期 为浸提液方式法,直接接触法和间接接触法三种_3]. 目前绝大多数医疗器械及材料是通过浸提液来进行 检测的_4J.其中细胞增殖度法和MTT比色法是目 前最为常用的浸提液试验,通过材料的浸提液与培 养的细胞广泛接触,可分析材料中各组成成分及其 浓度对细胞的毒性影响.本