固定化假丝酵母脂肪酶催化合成油酸丁酯.pdfVIP

2008年12月 新膜过程研究与应用研讨会论文集 ·243· 固定化假丝酵母脂肪酶催化合成油酸丁酯 李征，王曙光，张卫东* (北京化工大学化学工程学院，北京100029) 摘要：以固定化脂肪酶Cand／da sp．1619为催化剂，油酸和正丁醇作为底物，环己烷作为溶 剂，对合成油酸丁酯反应进行了探讨．结果表明，在25mL环己烷中，反应条件为：3mmol油酸 和3mmol正丁醇在50IU固定化酶催化下，37℃、200r／rnin下反应2h，转化率可以达到 90％，固定化酶连续使用18次后转化率仍可达到73％． 关键词：脂肪酶；油酸丁酯；固定化；酯化 Oleate)是一种重要的精细 油酸丁酯(rt—Butyl 化率可达90％以上．王军等[8]以固定化白地霉脂肪 化工产品，可用作机械油的油性添加剂、染料的表面 酶(Geotrichum candidum)催化油酸与不同醇的酯 湿润剂，还可以作氯丁橡胶、乙基纤维素的增塑剂和 化反应，在25℃下催化反应4h后，结果显示，油酸 湿润剂，多种食用或日用生活品香料，还可以作多种 与甲醇、乙醇反应生产油酸酯的转化率均较低，仅为 工业溶剂等uJ．目前商品化的油酸丁酯都是通过浓 18．1％和5．6％． 硫酸作为催化剂，在140℃左右，由油酸和丁醇酯化 然而，上述研究采用的多为进口脂肪酶，价格较 得到…2．该工艺操作具有腐蚀性强…、环境影响大、 高，此外，达到较高转化率的时间较长，这很大程度 副产物突出等缺点[4|，急待开发出一种新的工艺来 上限制了脂肪酶在油酸丁酯合成中的应用．本文选 克服以上缺点． 用一种可高效催化合成油酸丁酯的脂肪酶，通过固 与化学合成法相比，生物酶催化的反应具有条 定化并对固定化脂肪酶在油酸丁酯合成中的反应条 件温和、环境友好、特异性好、高效等特点，并在油脂 件进行了优化，以期为生物法高效合成油酸丁酯提 水解、生物柴油的生产等方面得到了很好的应用．然 供参考． 而，将生物酶用于油酸丁酯的研究并不多见．不过， 在仅有的少量研究中，发现脂肪酶也可发挥积极的 1材料和方法 作用．如Habulin等【5j5利用中空纤维膜将毛霉脂肪 1．1主要试剂和仪器 酶(Mucormiehei)通过超滤的方法制成固定化脂肪 假丝酵母脂肪酶(Candidasp．1619，10万U／ 酶．用这种固定化脂肪酶来催化油酸和正丁酯的酯 g)粗酶粉，购自北京凯泰新世纪生物技术有限公司； 化反应，反应过程中将生成的副产物水通过膜从油 疏水PTFE／无纺布复合膜，购自浙江格尔泰斯环保 相中分离出来，在约24h后反应转化率达到 特材科技有限公司；油酸AR，购自广东省汕头市西 88．11％．Ghamgui等∞J将米根霉(Rhizopusoryza2e) 陇化工厂；正丁醇AR，购自北京化工厂；其余试剂 固定在cac03载体上，在37℃，200r／min条件下， 均购自天津福晨化学试剂厂．数显恒温振荡器SHA 分别在有机溶剂体系(正己烷为反应介质)及无溶剂 —C，江苏金坛荣华仪器制造有限公司；电子天平 体系下催化合成油酸丁酯，反应20h后转化率最高 Y凹1370．oHAIIS Crop．USA． 达到73％，而且固定化酶连续使用6次其活性无下 1．2固定化脂肪酶的制备 降．刘瑛等一J以反向微乳凝胶固定化脂肪酶催化油 称取一定量酶粉加入到磷酸盐缓冲溶液中 酸和正丁醇的酯化反应，在