RNA结合蛋白HuR在肿瘤及非肿瘤细胞系中的表达及定位.docVIP

RNA结合蛋白HuR在肿瘤及非肿瘤细胞系中的表达及定位 用癌症杂志2007年1月第2鲞墓翅Th堕塑笪?5? RNA结合蛋白HuR在肿瘤及非肿瘤细胞系中的表达及定位 刘慧玲高雪芹韩金祥 【摘要】目的观察HuR基因在不同肿瘤细胞及非肿瘤细胞系的表达及分布情况.方法应用免疫荧光技术及 半定量RT.PCR技术,检测6种细胞株(结肠癌高转移细胞株LoVo,结肠癌低转移细胞株HT-29,人乳腺癌细胞株MDA— MB一231,肝癌细胞株HepG2,人卵巢癌细胞株3AO和人脐静脉细胞株ECV304)中HuR的表达情况.结果6种细胞 中HuR基因均有表达且其mRNA表达水平相当,但是在不同细胞的分布规律各不同.结论HuR蛋白在6种不同细胞 中表达的部位和规律不同,为进一步研究其胞质表达的分布机理奠定了基础. 【关键词】HuR蛋白;结肠癌;卵巢癌;乳腺癌;免疫荧光 中图分类号:R73—354文献标识码:A文章编号:1001-5930(2007)01-0005-04 ExpressionandDistributionofRNABindingProteinHuRIn TumorousAndNontumorousCellLines LIUHui-ling,GAOXue-qin,HANJin?xiang,eta1.ShandongMedicinalBiotechnologyCentre,KeyLaboratoryforBiotechDrllg$ MinistryofHealth,KeyLaboratoryforModernMedicineandTechnologyofShandongProvince,ShandongAcademyofMedicalSci- enee,250062 【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionanddistributionofHuRproteinindifferenttumorousandnontumorous celllines.MethodsTodetecttheexpressionofHuRwithimmunofluorescenceandsemi-quantitatingRT-PCRinsixcelllines (colorectalcancercelllineLoVoandHT-29,humanbreastcancercelllineMDA-MB-231,hepaticcarcinomacelllineHepG2, humanovariancancercellline3AOandhumanumbilicalveinendothelialcelllineECV304).ResultsHuRWasexpressedinall sixcellsWhosemRNAhaverelativeequalexpressionlevel,buthasdifferentdistributionsiteindifferentcells.ConclusionIn sixdifferentcellsHuRproteinexpressesindifferentdistributionandhasdifferentregulation,whichestablishesthebaseofafur- therresearchinHuRproteinSexpressionincytoplasm. 【Keywords】HuRprotein;Coloncarcinoma;Ovariancancer;Breastcancer;Immunofluorescence (ThePracticalJournalofCancer,2007,22:005～008) HuR是RNA结合蛋白中胚胎致死异常视觉(em— bryonielethalabnormalvision,ELAV)家族的一员,分 子量为36kD.在哺乳动物细胞中广泛表达….许多 早期反应基因的mRNAs在其3非翻译区(untranslat— edregions,UTR)有AU富含元件(AU—richelements, AREs),可以与顺式反应元件一起调节mRNAs的不稳 定性J.根据AREs的序列和衰减能力可将其分为 3种类型L2J:I型AREs,在富含U区包含1～3个 AUUUA拷贝.II型AREs,在富含U区包含至少2个 UUAUUUA(U/A)(U/A)拷贝.III型AREs,在富含U 区缺少典型的AUUUA元件.HuR可以与这3种AR. Es相互作用,并且在转染哺乳动物细胞后稳定包含 AREs的mRNAs并使之过表达J.Hu蛋白含有3个 基金项目:山东省自然基金责助项目(Y2OO3co3) 作者单位:250062山东省医药生物技术研究中心,卫生部生物技术 药