冷却对大鼠难治性癫癎模型海马神经细胞存活率的影响.pdfVIP

566 ChinJClinNeurosei2011，19f6)，566-570 冷却对大鼠难治性癫痈模型海马神经细胞存活率的 影 响 韩春锡 一，文善姬 ，路新国 ，胡 雁 ，曹 娟 ，李志川 ，廖建湘 (深圳市儿童医院 神经内科，儿科研究所 518026) 关键词 难治性癫痫； 冷却； 海马组织培养； 细胞死亡； 模型；大鼠 摘要 目的：探讨不同冷却温度和冷却时间对大鼠难治性癫痫模型海马神经细胞存活率的影响。方法：①6gmolL·。。 荷包牡丹碱(Bic)+4一氯基吡啶(4．AP)联合刺激培养的大鼠海马组织切片(OHS)诱发痂样放电，制作难治性癫痂OHS模 型；②在36~C和25℃培养 1～24h；⑧在36~C、30~C、25℃、20~C和 l5℃培养6h；④分别测定OHS神经细胞的碘化 丙啶(PI)摄取量。结果：Bic+4一AP联合刺激3h后，摄取PI的神经细胞首先出现在海马的CA2区。随着刺激时间的 延长 ，摄取PI神经细胞的分布范围扩散到其他区域，以CA3区最为明显。25℃冷却处理可以显著抑制神经细胞的PI摄 取，然而，20℃、15℃深低温冷却处理可进使神经细胞的PI摄取。结论：①培养的大鼠海马组织CA2区的神经细胞 对Bic+4一AP联合刺激最敏感，神经细胞的损伤与兴奋性刺激时间和海马的区域有关；②冷却处理神经细胞的保护作用 与冷却的温度和时间有关。 EffectofCoolingonSurvivalRateofHippocampalNeuronsfrom RefractoryEpilepsyM odels HAN Chun—Xi，，WEN Shan—Ji，LUXin—Guo，HU Yan，CAO Juan，LIZhi—Chuan，LIAOJian—Xiang Department ofNeurology，InstituteofPediatrics，ShenzhenChildren’SHospital，Shenzhen518026，China KEY WORDS refractoryepilepsy；cooling；hippocampussliceculture；celldeath；model；rat ABSTRACT Aim ：Toinvestigatetheeffectofdifferentcooling—-temperatureandcooling—-durationon survivalrateofhippocampalneuronsfrom therefractoryepilepsymodels．M ethods：A finalconcentration of6gmolL·’。ofbicuculline(Bic)and4一aminopyridine(4一AP)wasappliedtoculturingorganotypichippocampal slice(OHS)todevelopthererfactoryepilepsymode1．Theviabilitymarkerpropidiumiodide(PI)wasusedto monitortheneuronalcel1deathinthecultureontheconditionof36oC and25℃ for24h，and36℃ ，30℃ ， 25℃ ．20~C and15℃ for6h．Thedigitalimageswereanalyzedbyusingadensitometryanalysisprogram． Results：AfterstimulatingbyBiccombinedwith4一APfor3honratOHScultures．thePIuptakeapperaedin theCA2sectoratthefirsttime．W iththetimeofstimulationincreasing，thedistributionofdamagedneuronal cellswasextendedtolragearea，predominantlydistributedintheCA3sector．Thedamagedneuronalcells’PI uptakeweresignificantlyinhibitedbycoolingtreatmentat25~C ofr3hto12h，however，thePIuptakecould bepromotedbythedeephypothermiccoolingtreatmentat20~C and15~C．