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苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定

※基础研究 食 品科 学 2011,Vo1.32,No.19 33 苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定 颜 军 1,孙晓春2,谢贞建 1,何 钢1,易 勇1,房 晨 1,苟小军II221 (1.成都大学中药化学实验室,四川 成都 610106;2.四川抗菌素工业研究所,四川成都 610052) 摘 要:采用水提醇沉法获得苦荞多糖,经离子交换柱分离,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)纯度鉴定并测定多糖 的相对分子质量。硫酸水解后,用 1一苯基 .3.甲基一5.吡唑啉酮(PMP)衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液 相色谱法测定单糖组成。结果表明:苦荞经水提醇沉,用Sevag法脱蛋白后,获得苦荞多糖(TBP);DEAE.纤维 素柱层析获得3个苦荞多糖组分TBP一1、TBP2和TBP一3,相对分子质量分别为 144544、445656和636795。柱 前衍生液相色谱分析可知:TBP.1、TBP.2是由葡萄糖组成的均一多糖;TBP.3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛 酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成的杂多糖,其物质的量 比为4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2.02。 关键词:苦荞;多糖;单糖;衍生化;高效液相色谱法 PurificationandMonosaccharideCompositionAnalysisofTartaryBuckwheatPolysaccharides YANJun,SUNXiao—chun,XIEZhen—jian,HEGang,YIYong,FANGChen,GOUXiao—jun,, (1.LaboratoryforChemistryofTraditionalChineseMedicine,ChengduUniversity,Chengdu 610106,China; 2.SichuanIndustrialInstituteofAntibiotic,Chengdu 610052,China) Abstract:Tartarybuckwheatpolysaccharides(TBPs)wereextractedbyboilingwater,precipitatedbyalcoholandpurified byion-exchangecolumnchromatography.ThepuritynadmolecularweightofTBPsweredeterminedbyhighperformnacegel filrtationchromatography(HPGFC).Polysaccharidesampleswerehydrolyzedwithsulfuricacidsolution,nadderivatizedwith 1-phenyl-3一methyl-5一pyrazolone(PMP).ThemonosaccharidecompositionofhtehydrolysatesobtainedwasnaalyzedbyRP- HPLC.TheresultsshowedthatTBPscouldbeobtainedbywaterexrtactionandalcoholprecipitationafterproteinremovalby Savagmethod.Threepolysaccharides,nma edasTBP一1,TBP一2nadTBP一3,wereobatinde byDEAE—cellulosecolumnchroma— tographywihtmoleculraweightsof144544,445656nad636795,respectively.Liquidchromatographicnaalysisbasedonpre— columndefivatizationshowedhtatTBP-1na dTBP·2werecomposedofglucoseandTBP一3ofmannose,rhamnose,glucuronic acid,glucose,galactosenadarabinoseinamolraratioof4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2

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