环境激素类污染物对斑马鱼胚胎的毒性效应 （太原）.ppt

环境激素类污染物对斑马鱼胚胎的毒性效应 朱琳 端正花 郑敏 南开大学环境科学与工程学院 天津 300071 太原，2010年8月7－9日 前言 发育时间/h 毒理学终点 4 卵凝结、囊胚发育 8 外包活动阶段 12 原肠胚终止 24 尾部延展、眼点发育、20s内的主动 运动 32 心跳开始、血液循环 48 黑色素细胞发育、心律、耳石发育 72 孵化率、畸形情况（如水肿、尾畸等） 结果与讨论: 这两种污染物的毒性强度差异明显，而且效应表现也不相同。 五氯酚0hpf染毒48h的LC50值为70.8μg/l；48h胚胎中产生心胞囊肿、血液循环障碍且无心律的EC50=21.4μg/l。 双酚A 0hpf染毒24h的LC50=16.36 mg/L；染毒72h后，影响孵化率的EC50=13.12mg/L， 结果与讨论： 五氯酚： 不同染毒时间的48h半数致死效应(μg/l) 结果与讨论： 五氯酚： 不同染毒时间的半数效应浓度(μg/l) 效应1：影响孵化率的48h EC50；效应2：停滞发育的24h EC50；效应3：产生心胞囊肿、血液循环障碍和无心律的48h EC50。 结果与讨论: 双酚A: 结果与讨论: 双酚A: 结果与讨论: 双酚A: 结论: 1） PCP 对斑马鱼胚胎有一个特定作用时间段，PCP毒性主要作用于胚胎发育的前6小时。 2）PCP对斑马鱼胚胎起始染毒时间相同，作用时间长短不同，产生的毒性大小有所差异。 3 3）PCP在0hpf染毒对斑马鱼胚胎的毒性最大。PCP对斑马鱼产生急性毒性效应的亚致死效应的敏感度顺序为：心胞囊肿、血液循环障碍和无心律＞孵化率降低＞停滞发育作用。 4）斑马鱼胚胎对PCP最敏感的指标为48h血液循环障碍和48h半致死效应。 5）BPA对斑马鱼胚胎亚致死毒性作用的敏感终点为：孵化率 水肿率 血液流动障碍 尾畸。 6）斑马鱼胚胎在8h吸收的BPA就能达到毒性效应水平，证明BPA在早期就可能对胚胎基因产生突变作用，而不是长时间毒物积累作用的结果。 谢 谢 各 位！ * 前言 长期以来，五氯酚（PCP）和双酚A（BPA）作为重要的工业原料被广泛生产和应用，大量进入环境，污染了土壤、水源以及动植物，并可通过食物链进入人体。诸多文献已经确证这两种污染物对水生生物和哺乳动物都有一定的类雌激素作用。 斑马鱼胚胎毒性技术是各国际标准组织认可的测定单一化学品毒性标准测定方法之一，属于致畸效应检验。该项技术成本低、影响因素少、可重复性好、易操作、灵敏度高，是具有可记录多项毒性指标的特点，并可以此判断污染物的致毒机理。 材料与方法: 成年斑马鱼（雌雄鱼数量比约为1：2）饲养在经活性炭过滤并充分曝气的水体内，水温保持在26±1℃左右，光照/黑暗周期控制为14h:10h。每天开灯之前将鱼卵收集器放入缸内，给光30min内完成交配和产卵，一小时后将鱼卵搜集器取出。用重组水迅速清洗鱼卵以除去残余物，用于进行毒性实验。选用24孔细胞培养板作为染毒器具，实验时每孔加入2ml试液，放入一枚受精卵。 斑马鱼饲养装置 染毒过程 材料与方法: 正常发育过程 *