电穿孔法诱导gus基因在坛紫菜原生质体中的-上海海洋大学学报.pdfVIP

3 3 Vo!.3. No.3 第 卷第 期 上海水产大学学报 1994年9月 JOURNAL OF SHANGHAI FISHERlES UNIVERSITY Sep.. 1994 电穿孔法诱导GUS基因在坛紫菜 原生质体中的瞬间表达 TRANSIENT EXPRESSION OF GUS GENE IN PORPHYRA HAITANENSIS BY ELECTROPORATION TRANSFORMATION 王素捐李晖 (上 海水产大学渔业学院. 200090) Wang Su-juan and Li Hui (Fisheries College. SFU. 200090) 李瑶沈大棱 (复旦大学遗传学研究所. 200433) Li Yao and Shen Da-leng Genetics. Fudan University. 200433) 关键调 电穿孔法，遗传转化，坛紫菜，原生质体，瞬间表达 EYWORDS electroporation. gene transfor tion. Porρhyra haitanen.�is. protoplast. K ma tranSlent expreSSlOn 基因工程研究已在高等植物中广泛开展，尤其对重要经济作物如水稻、玉米、大豆等的品种改良不断取得 可喜成果。在藻类 中基因工程起步较晚。Rochaix和 VanDil1ewjin 于1982年第→次报道了对单细胞衣藻以质 粒为载体进行的基因转移[，R ochaix等.1982 J，Veeck等于 1987年以蓝藻为 材料进行了基因转移的研究， Boynton等于1988年以衣藻为材料成功地得到了转基因藻株C王素娟.1994J。除蓝藻和单细胞绿藻外.外源基 en e y rt 因导入大 型藻类 的工 作尚未见成功的 报 道。 Ch 与 Ku zman 用表基因枪将GUS 基 因导入红藻 (Ka仲呻hycu alvarezij) 中得到瞬间表达【Cheney等.1990J.但未见正式报道。国内中国科学院海洋研究所有 关于用基 因枪法把 GUS基因导入褐藻海带和裙带菜组织块中培养 至48小时并检测到瞬间表达【秦松等， 1994J. e ectroporation ) 在基因转移的多种方法中，电穿孔法( l 是应用最广的方法之一.用这种方法己成功地转化 了玉米、水稻、烟草等高等植物.它利用短暂加到细胞膜上的高压电场使其形成一些可迪的瞬时孔洞，从而允 1994-07-16收到. 146 上海 水产 大 学 学 报 s卷 许质粒DNA通过它们进入细胞。电穿孔法的优点在于它可广泛地应 用于不同物种，并且对原生质体纯度要 aMV 求不高，为转化后的培养工作 带来便利。本研究即采用电穿孔法把带有35SC 启动子(如图l中