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Feulgen染色观察有丝分裂
Feulgen染色观察有丝分裂 一、实验目的: 1、掌握Feulgen染色的原理、方法及操作步骤; 2、观察并掌握有丝分裂各分裂时相的特点。 二、实验原理: DNA经温稀酸水解,其上的嘌呤碱和脱氧核酸之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂中的无色品红反应,形成紫红色的化合物, 因此Feulgen反应中,显示紫红色的细胞部位,即标志有DNA的存在。Feulgen反应现仍广泛用于DNA的定性定位和定量的显微测定技术上。 ? 三、实验材料: 大蒜根尖、小麦根尖 一、实验步骤: 1、取生长状态良好,约0.5-1cm长的根尖于固定液中固定数小时,然后转入70%酒精中保存; 2、将上述材料转入1mol/L HCl溶液中,在60℃恒浴条件下解离7-15 min(大蒜根尖约7min、小麦根尖约15min); 3、蒸馏水冲洗后,加入Schiff试剂,避光染色约8-10min后,直到根尖染上红色,然后倒掉染料,加入蒸馏水; 4、将染色后的根尖,放在载玻片上,切去未着色部分,加一滴蒸馏水,盖上盖玻片,先用大拇指压一下,然后用橡皮头铅笔对准材料轻轻敲打,使根尖细胞分散开; 5、用吸水纸吸去盖玻片周围多余的水; 6、显微镜观察。 一、? 实验结果: 1、Feulgen染色后呈紫红色反应的区域; 2、? 观察并识别有丝分裂的前、中、后、末四个时期的典型特征; 二、? 实验作业: 1 绘制你所观察到的有丝分裂前、中、后、末四个时期的图象。 * * 预备实验结果
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