转抗除草剂基因小麦植株的筛选方法研究-麦类作物学报.pdfVIP

麦类作物学报 　2008 ,28 (6) :935 - 940 J ournal of Triticeae Crop s 转抗除草剂基因小麦植株的筛选方法研究 周淼平 ,余桂红 , 任丽娟 , 朱伟芳 , 马鸿翔 (江苏省农业科学院农业生物技术研究所 ,江苏南京 2 100 14 ) 摘 　要 : 为了降低小麦转 ba r 基因时产生较高比例的假阳性植株 ,采用测定 T0 代转基因植株叶片释放 N H + 浓度和对 T 代植株喷施 Bast a 除草剂等辅助筛选方法 ,建立了简便有效的转 ba r 基因小麦筛选体系 。 4 1 研究结果表明 ,2 叶期和 5 叶期叶片释放的N H + 浓度与 ba r 基因 PCR 检测结果呈极显著相关 ,相关系数分 4 别为 0 . 86 和 0 . 75 。对 39 1 株 T 代再生植株进行叶片释放 N H + 浓度测定 ,筛选到 34 株转基因植株 ,其中27 0 4 ( ) 株为 ba r 基因的 PCR 检测所证实 。用 100 mg/ L Ba st a 除草剂对 381 株 T0 代植株的后代 3 800 余株 进行喷 施筛选 ,根据后代抗性分离筛选到 13 株 T0 代阳性植株 ,与 PCR 检测结果吻合度达到 100 % 。这两种方法可 用于以 ba r 基因为选择标记基因的转基因植株的筛选 。 关键词 :小麦 ; ba r 基因;遗传转化 ;筛选 ( ) 中图分类号 :S5 12 . 1 ; S336 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2008 Screening of Transgenic Wheat Plants Resistant to Herbicide ZHOU Miaoping , Y U Guihong , REN L ij uan , ZHU Weifang , MA Hongxiang ( In stit ut e of Biot echnology , Jiangsu Academy of Agricult ural Sciences , N anj ing , J iangsu 2 100 14 , China) Abstract : Screening and identification of t ran sgenic p lant s are t he key factor s for succe ssf ul t ran sfor mation . To decrea se t he e scap e p lant s in w heat t ran sfor mation exp eriment s , t he det ectio n of ammonium ion relea sed f ro m