盐胁迫对雨生红球藻虾青素累积虾青素合成相关酶-中国水产科学.pdf

中国水产科学 2017 年 11 月, 24(6): 13421353 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.16324 盐胁迫对雨生红球藻虾青素累积、虾青素合成相关酶基因表达和 抗氧化指标的影响 1 2 3 江红霞 , 林雄平 , 轩文娟 1. 河南师范大学 水产学院, 河南 新乡 453007; 2. 宁德师范学院 生物系, 福建 宁德 352100; 3. 河南师范大学 生命科学学院, 河南 新乡 453007 摘要: 为探讨盐胁迫对雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)虾青素合成的影响与机理, 以及雨生红球藻各抗氧化 机制之间的关系, 本研究采用生化和分子生物学方法研究了不同浓度(0.04 mol/L、0.08 mol/L、0.12 mol/L 和0.16 mol/L) 和不同时间(3 d 、6 d 和9 d) 的盐(NaCl)胁迫对雨生红球藻生长、虾青素积累、番茄红素β-环化酶(Lcy) 、β-胡萝卜 素羟化酶(CrtR-B)和β-胡萝卜素酮化酶(Bkt)基因表达、超氧化物歧化酶(SOD) 、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧 化物酶(GSH-Px) 的活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明, 各胁迫时间的雨生红球藻的密度均随着盐胁迫 浓度的增加而不断下降, 在盐胁迫的第 9 天, 雨生红球藻的死亡率和孢子比例均随着盐胁迫浓度的增加而不断升 高; 雨生红球藻虾青素含量、Lcy 、CrtR-B 和Bkt 基因表达量均随着盐胁迫浓度和时间的增加而不断提高; 雨生红 球藻 SOD、CAT 和GSH-Px 活性以及MDA 含量在不同浓度和不同时间的盐胁迫下与对照组(0.00 mol/L NaCl)相比 均升高, 且在不同时间的0.12 mol/L NaCl 胁迫下与对照组相比均显著升高(P0.05); 雨生红球藻虾青素含量、Lcy 、 CrtR-B 和Bkt 基因表达量在盐胁迫的早期(第3 天)和中期(第6 天) 阶段较低, 在盐胁迫的后期(第9 天) 阶段较高, 而 SOD、CAT 和GSH-Px 活性以及MDA 含量在盐胁迫的早期和中期阶段较高, 在盐胁迫的后期阶段较低。实验结果 说明了适当浓度和时间的盐胁迫能促进雨生红球藻累积虾青素, 雨生红球藻在盐胁迫下主要是通过提高虾青素合 成相关酶基因的转录水平来促进虾青素的合成, 其虾青素和抗氧化酶的抗氧化活性可能互为补充, 共同保护雨生 红球藻免受盐胁迫的氧化损伤。 关键词: 雨生红球藻; 盐胁迫; 虾青素; Lcy ; CrtR-B ; Bkt ; 抗氧化酶; MDA 中图分类号: S96 文献标志码: A 文章编号: 10058737(2017)06134212 雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是绿藻 饲料领域都有很好的应用前景[2] 。 门、团藻目、红球藻科、红球藻属的一种淡水单 研究表明, 通过人为的设置高光照、高温、 细胞微藻。该藻在不利的环境条件下能产生大量 高盐或营养饥饿等胁迫手段, 可以促使雨生红球 的虾青素, 含量可高达其干重的5.0% [1] 。虾青素 藻在恶劣的生存环境下由游动细胞转变为不动孢 [3–8] (astaxanthin, 3-3ʹ,二羟基-β-β胡萝卜素-4-4ʹ,二酮) 子, 并大量合成和积累虾青素 。雨生红球藻中 是一种氧化型类胡萝卜素, 是一种近年来进入国 的虾青素的合成是在一系列酶的作用下完成的, 际研发领域的高价值的生物活性物质, 它具有极 其中番茄红素β-环化酶(Lcy)、β-胡萝卜素羟化酶 强的抗氧化活性, 被誉为是“超级维生素 E”,