浅析激光技术与生命科学2.pptVIP

* 光镊的应用 原生 质体的 融合 单个活 力精细 胞研究 激光 诱导转 基因 抗体抗 原结合 强度 分选 单条染 色体 细胞膜 弹性的 测量 分散 体系的 研究 纳米 生物学的 研究 微粒 的空间 排布 光镊的应用研究 * Interaction of RecA Binding ssDNA with dsDNA dsDNA Unwinding dsDNA RecA binding ssDNA d(t) Optical tweezers Change in the length of dsDNA Rotational motion of the trapped particle 国际研究成果举例 * AOM-BasedOscillatoryTweezers Liposome AO square wave DC5.5V±2.5v 1kHz Diameter=3μm 2beam distance=2.88μm 1064nm laser Optical tweezers * 烟草细胞 原生质体的融合 单细胞融合 光镊操控单细胞融合实验方法 * RBC Stretching Using a Parallel Dual-Tweezers * Optical Stretcher J. Guck et al., Biophys J 81, 767 (Aug, 2001). J. Guck, R. Ananthakrishnan, T. J. Moon, C. C. Cunningham, J. Kas, Phys Rev Lett 84, 5451 (Jun 5, 2000) 5mW 500mW * 光镊分选单条染色体 水稻细胞 --- 荧光标记 ---- 细胞残核 --- 染色体群 * 分散体系中微粒的聚集通常都是随机的。用逐个操控单个粒子的方法。按设定要求排布出具有稳定空间结构的粒子聚集体。 光镊在三维空间排布微粒 纳微器件，微机械，生物器件的组装和表征 * 建立了光镊研究单分子力学行为的实验方法。 * 光镊操控的原理和方法 操控物体并使之运动---具备能够产生相对的运动的条件 本实验设计:光镊静止, 光镊操控细胞所在环境运动 方法: 显微镜平台以速度V带动样品池运动, 被光镊捕获的粒子与环境产生相对运动 光捕获 * 光镊力的测量原理和方法 流体力学方法Stokes公式: 其中η为液体粘滞系数，R为微粒的半径，当速度增加到Vmax时,细胞将脱离光镊的束缚离开光阱,此Vmax为细胞的逃逸速度。 当光阱捕获一个处于流场中的微粒时，光阱力和流场的粘滞阻力相平衡，该粘滞阻力符合斯托克斯公式 。 显微镜平台 显微镜平台 光镊 * 1.光镊光源 2.光学耦合器 3.全反射镜 4.双向分束板 5.会聚透镜/高倍物镜 6.样品台 7.样品池 8.样品照明电源 9.激光滤波片 10.数码摄影头 11,12.图象显示与处理 光的力学效应实验光路图 实验装置和光路 样品台 光镊光源 * 光镊的实验装置图 * *光镊光源780nm，功率100mW *酵母细胞直径约 5μm *物镜可调范围10mm,微调最小分度2μm每小格 *系统放大约4000 倍 *平台调节范围：110mm ×70mm *视频图像每六个像素为1μm *每两帧图像之间的时间间隔为1/15秒 *静态和动态显微图象实时显示,记录,回放 *计算配套软件Lasertrap 光镊系统的参数 * 光镊俘获微粒 激光波导引导操控微粒 激光引导红细胞 激光引导酵母菌 * 谢谢大家！ * * * * 在能夠量測DNA的訊號之後，當我們希望能在實驗中加入一段與dsDNA有互補序列的 ssDNA 這段ssDNA會binding上RecA protein RecA protein會辨識dsDNA上互補的位置並將雙股螺旋解開 在解開的同時 我們預測DNA會有長度的變化 可以藉由偵測小球的訊號確認 同時也希望得到旋轉的訊號 利用將這兩種訊號也許我們就能描述RecA protein在DNA replication的作用過程，而不是只知道RecA的作用。 * 激光在细胞研究中的应用 * 光的力学效应？光有力量吗？ 光子与物体的相互作用 * 光携带有能量和动量（线性动量和角动量）,光与物体相互作用时彼此交换能量和动量. 光子能量：