SDF-1α复合Pluronic F-127的构建及其对BMSCs的体外生物效应研究.pdfVIP

UniversitatisMedicinalisAnhui2014 安徽医科大学学报Acta Aug；49(8) F·127的构建及其 SDF-la复合Pluronic 对BMSCs的体外生物效应研究 田甜1，程继光2，周健1 摘要目的构建装载基质细胞衍生因子．1d(SDF-lot)的 胞可积极地参与软骨内的骨修复H1。然而，骨缺损 Pluronic F-127新型复合材料，并研究其对骨髓间充质干细处相对较低的骨再生能力限制了骨的再生数量HJ， 胞(BMSCs)的体外生物效应。方法构建装载不同浓度 并且骨的再生修复主要取决于其募集的干细胞数 SDF-l Ot(200、50ns／m1)的PlumnicF·127复合水凝胶，采用 量。因此，增加骨损处SDF一1仪的表达对其募集 Transwell小室进行复合水凝胶对BMSCs的体外趋化实验。 BMSCs以及骨损修复都起着关键作用。现通过构 将BMSCs与复合材料均匀混合，加成骨细胞诱导液进行培 建复合SDF一1et的PluronicF一127水凝胶，探讨其在 养，并对其行碱性磷酸酶(AKP)活性测定及茜素红染色，由 体外条件下对BMSCs的募集能力和促成骨作用，以 结果可观察到BMSCs的成骨诱导分化情况，并用MIq法检 测复合培养后细胞的活性状况。结果趋化实验结果显示， 期为应用细胞复合材料进行骨缺损的组织工程修复 研究提供新的途径和实验依据。 含SDF-lot浓度为200ng／ml的复合水凝胶对BMSCs的募集 效果显著(P0．05)。MTr法证实了PluronicF-127对细胞 1材料与方法 增殖不产生影响(P0．05)。BMSCs-复合材料、单纯BMSCs 在成骨诱导培养条件下，两组细胞的AKP表达量均明显增 1．1材料 高，并且都高于非成骨诱导组(P0．05)，同时诱导组镜下 1．1．1实验动物sD大鼠，清洁级，4—6周龄，体 可见明显的钙结节形成。结论 成功构建装载SDF-l仅的重60～80 g，雌雄不限，由安徽医科大学实验动物中 Pluronic F一127新型复合材料，其在体外对BMSCs有明显的 心提供。 趋化作用，在细胞材料复合培养的三维支架中，BMSCs能够 存活并被成功诱导分化为成骨细胞。 mo 关键词基质细胞衍生因子一lot；PlumnicF-127水凝胶；骨髓 间充质干细胞；成骨诱导分化 中图分类号R318．08 文献标志码A文章编号1000—1492(2014)08—1096—04 骨髓间充质干细胞(bone stem mesenchymal cells，BMSCs)具有多向分化能力，被认为是最具潜ar公司)；BCA蛋白定量试剂盒(北京原平皓生物技 术有限公司)；碱性磷酸酶试剂盒(南京建成生物工 能的种子细胞…。基质细胞衍生因子一1et(stromal derived cell factor—let，SDF—let)可通过其受体CX—程有限公司)；茜素红(上海三爱思试剂公司)。 1．2方法 CR4对BMSC