左归丸及其有效成分对T 细胞的免疫调控研究.docVIP

精品论文 参考文献 左归丸及其有效成分对T 细胞的免疫调控研究 苏绍祥1 施亚娟2 （ 1 昆明医学院海源学院病原暨免疫、检验诊断综合实验室 650106） （ 2 昆明医学院海源学院医务室 650106） 【摘要】目的 对左归丸及其有效成分对T 细胞的免疫调控及免疫调节作用机理进行探究分析。方法 选用Balb/c 小鼠50 只，平均分成5 组，每组10 只，分别为阴性对照组、阳性对照组、左归丸高中低剂量组。经处理后7 天，对左归丸及其有效成分对T 细胞的免疫调节作用的结果进行统计分析。结果 Balb/c 小鼠经过不同剂量的左归丸进行处理后，其脾细胞中的IFN-gamma;、IL-2、IL-4、IL-10mRNA 的表达水平均受到了不同程度的抑制作用。结论 通过实验研究得出，左归丸能够使活化状态下的小鼠T 细胞对T h1/ T h2 类细胞因子的分泌能力受到抑制而降低；能够使小鼠的异种被动皮肤过敏反应斑的形成得到减轻，对T 细胞的特异性免疫反应产生抑制。 【关键词】左归丸 有效成分 T 细胞 免疫调控 【中图分类号】R392.12 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）07-0360-01 在我国传统中药方剂中左归丸是一类具有补益作用的方药，该方的配伍组成为地黄、枸杞、山药、川牛膝、山茱荑、鹿角胶、龟板胶以及菟丝子等这八味药物组成，主要功效为滋阴补肾，填精益髓，主要用于治疗真阴不足证，该证的主要表现为头晕目眩，遗精滑泄，腰腿酸软，口燥舌干，舌自汗盗汗，红少苔，脉象细等症状。目前在临床上该方主要用来对高血压、耳源性眩晕、贫血、性机能减退、腰肌劳损、神经官能症等进行有效地治疗。最近一阶段国内外还未有关于左归丸免疫抑制功能方面的一些研究与报道，日、韩等中药免疫药理专家通过研究得出结论，六味地黄丸与左归丸在组方、药效作用等方面具有相似性，对效应性T 细胞的细胞因子也同样具有明显的调节作用，在两方的配伍中，熟地黄均为君药。因此我们推断出左归丸及其有效成分会对T 细胞的免疫调控作用产生一定的抑制作用，为此我们进行了本次研究，以下为本次研究的主要内容。 1 资料与方法 1.1 一般资料 在本次研究中随机抽取健康的B a l b / c 小鼠50 只，将其平均分成5 组，每组10 只，在这50 只小鼠中均为雌性小鼠，这些小鼠的年龄在6-8 周之间，小鼠的平均体重为（21plusmn;1.3）g 左右。以上所统计的一般资料均不具有明显的统计学差异，可以在分析中予以对比分析。 1.2 方法 随机抽取健康的B a l b / c 小鼠50 只，将其平均分成5 组，每组10只，一次定义为阴性对照组、阳性对照组、左归丸高剂量组、左归丸中剂量组、左归丸低剂量组，阴性对照组灌服生理盐水，标准为每千克10毫升；阳性对照组在灌服生理盐水的同时给予H C 肌注，标准为每千克12.5 毫克；左归丸高中低剂量组分别灌服左归丸22g/Kg、15.5g/Kg、8.8gKg，坚持每天定时给药1 次，处理连续7 天，在最后一次给药之后，各组小鼠均给予尾静脉注射小剂量的ConA 对T 细胞的增值进行刺激，4 小时后将小鼠处死，对组织与细胞进行分离。在进行相关的测定。 1.3 数据处理 在本次研究过程中所得到的所有相关数据，均采用S P S S14.0 统计学数据处理软件进行处理分析，当P ＜ 0.05 时，我们认为数据之间有明显的统计学差异。 2 结果 通过实验得知，左归丸体外对小鼠淋巴细胞增殖所产生的抑制作用对药物剂量具有一定的依赖性。主要表现为：在左归丸制剂对小鼠脾脏淋巴细胞体外进行干预的条件下，C o n A 刺激培养三天之后，发现在培养体系中由于左归丸浓度发生增大，而导致淋巴细胞集落的形成出现显著减少的现象。采用MT T 法进行检测的结果表明，在对小鼠脾细胞予以不同浓度的左归丸进行干预培养之后，其T 细胞对ConA 刺激所产生的增殖能力发生率显著降低的现象。 左归丸体外对小鼠T h l ／ T h2 类细胞因子所产生的抑制作用对剂量同样具有一定的依赖性。在体外左归丸制剂的干预条件下，C o n A 刺激培养三天之后，R T - P C R 的检测结果表明，左归丸的浓度在0、2、4u l ／ 2m l 的时侯，同对照组进行比较，小鼠脾脏淋巴细胞T h l ／ T h2类细胞因子IFN-gamma;、IL-2、IL-4、IL-10 的RDV 值未发生显著的变化。然而随着左归丸浓度的不断增大，与对照组比较小鼠脾脏淋巴细胞T h l／ T h2 类细胞因子的R D V 值，发生率