DNA条形码在中药鉴定中的应用.docVIP

精品论文 参考文献 DNA条形码在中药鉴定中的应用 赵兴蕊 (保山中医药高等专科学校中医药系 云南保山 678000) 【摘要】了解 DNA条形码技术的概念与特点，总结了DNA条形码在中药鉴定中三个方面的应用，说明DNA条形码技术在中药的鉴别中起了非常重要的作用。 【关键词】DNA条形码 中药鉴定 应用 【中图分类号】R282.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）02-0370-02 中药鉴定方法中的形态鉴别、显微鉴别、超微鉴别和化学指纹图谱等鉴定方法，在中药材的鉴定和评价其质量研究中发挥了非常重要的作用，但随着现代分子技术的快速发展，涌现出了一大批中药材DNA分子鉴定技术。 DNA条形码是利用标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段自身在物种种内的特异性和种间的多样性而创建的一种新的身份识别系统，它可以对物种进行快速的???动鉴定。[1]就像以超市条形码识别产品一样，利用A，T，C和G4个碱基在基因中的排列顺序识别物种。 DNA条形码技术具有以下几个显著的特点：① 直接利用DNA序列进行物种的鉴定，基于生物的基因型，具有独一无二的可重复性；② DNA条形码序列具有通用性，只需一对或几对通用引物，在不同物种之间具有可比性，在全球物种鉴定中可以形成统一的标准，适用于非专家物种鉴定；③准确性高，鉴别速度快，特定的物种具有特定的DNA序列信息，而形态学鉴别特征会因趋同和变异导致物种的鉴别失误，通过建立DNA条形码数据库，可一次性快速鉴定大量样本。 现把DNA条形码（DNA Barcoding）在中药鉴别中的应用总结以下三个方面： 1 对中药材的物种鉴定研究 药用植物形态的多样性，即使专业的鉴定与分类人员也难以将如此众多的物种进行准确鉴定。DNA barcoding鉴定技术为动植物来源中药材的物种鉴定研究提供了方便快捷的方法，以药用植物的部分叶片、种子或其它部位，以药用真菌的菌丝、孢子，以药用动物的毛发、血液或部分组织等，甚至对保存的标本和冰冻的组织，均可方便地提取较为完整的DNA，利用通用引物扩增短的DNA barcoding序列来实现动植物物种的快速准确鉴定。[2]任宝青等[3]利用4个DNA片段(r6cL、matK、trnL—F，26S rDNA)和65个广义形态学形状重建毛茛目的系统发育关系，并更新了毛茛目的分类系统；Hebert等[4]选取COI基因的一段序列对动物中的7门8目的不同种群进行种类鉴定，发现无论在门、目，还是在近缘种水平，该基因都具有较好的鉴定功能。 2 对中药饮片、粉末及传统中成药的鉴定研究 对于加工后的中药饮片、粉末和含有生药原型的传统中成药(丸剂、散剂等)的鉴定，形态鉴定已经无能为力，传统上采用显微结构、超微结构和化学指纹图谱研究进行鉴定，结构鉴定多为描述性，化学指纹图谱鉴定受到干扰的因素较多，有一定局限性。DNA barcoding鉴定技术实现鉴定的数字化和定量化，易于成为国际上通行的鉴定标准，针对加工后的中药饮片、粉末和以粉末人药的传统中成药的鉴定，可根据DNA存在部分降解的特点，设计通用引物扩增更短的DNA barcoding序列来实现动植物物种的快速准确鉴定。[2]如：Shaw[5]等用基于PCR方法的中药DNA分子鉴定技术AP—PCR法对人参属3种药材人参、西洋参与三七[P.notginseng(Burk.)F.H.Chen] 及4种伪品桔梗[Platycoclon grandiflorum (Jacq.)A.DC.]紫茉莉(Mirabilis jalapaL)、土人参[Talinum paniculatum (Jacq.) Gaertn] 和商陆(Phytolacca acinosa Roxb)进行了鉴别研究，得到了能区别三种人参属药材与伪品的指纹图谱。 3 对促进植物化学分类学和药用植物亲缘学的研究 植物化学分类学是研究植物化学成分在植物界的分布，分析植物化学成分与植物亲缘系统的相关性，探讨植物界的演化规律并为植物的开发利用提供科学依据；药用植物亲缘学是研究药用植物的植物亲缘关系一化学成分一疗效间的相关性的一门新兴的边缘学科，它对于开发药用植物资源具有重要指导意义。DNA barcoding技术结合传统的动植物形态分类学，与植物化学分类学、药用植物亲缘学共同促进药用动植物的系统进化树的构建，有助于科学地研究药用动植物的系统发育关系，进而推动植物化学分类学和药用植物亲缘学的发展和深入[2]。