ABO、RhD血型定型卡式检测方法应用评价.docVIP

精品论文 参考文献 ABO、RhD血型定型卡式检测方法应用评价 胡翠莲 陈志军（云南省西双版纳州人民医院 666100） 【摘要】目的 通过两种不同方法观察卡式血型检测方法在临床ABO、RhD血型定型中的应用效果。方法 采用血凝法与卡式法两种ABO、RhD血型定型卡式检测方法同时平行进行进行比较。结果 （1）ABO血型定型350例中两种方法检测结果完全相同，但其中3例血凝法凝集效价（++）；（2）RhD血型定型350例中两种方法结果一致。结论 ABO、RhD血型定型卡式检测方法与血凝法比较具有安全可靠，操作简单，试验结果准确，易判断等优点优于经典的血凝法。 【关键词】卡式检测方法 血型 微柱凝胶 随着A B O、R h D血型定型检测技术的快速发展，以及对医疗技术的要求不断提高，新的血型检测方法－卡式检测方法在国内大中型医院中迅速应用。卡式检测方法又称为微柱凝胶免疫检测技术，在微柱凝胶介质中，红细胞与相应的抗体结合，经过低速离心，凝集的红细胞悬浮于凝胶中，而未与相应抗体结合的红细胞沉在管底。 1 材料和方法 1.1材料 (1)微柱凝胶ABO、RhD血型卡(长春博迅生物技术有限责任公司生产),生理盐水,LXJ-专用离心机，FYQ孵育器。（2）振荡仪（TITRAMAX101），由瑞士帝肯公司生产；（3）ABO血凝法血型正定型检定卡，由长春博德生物技术有限责任公司生产。 1.2实验前准备 将所有的样品和试剂平衡至室温。 1.2.1凝胶卡处理 实验前，观察微柱凝胶卡中是否有汽泡及微柱内壁上是否粘有凝胶，如有则将其离心。 1.2.2红细胞悬液配制 取已离心的抗凝血红细胞10u l加生理盐水溶液1ml制成1％ 的红细胞悬液。 1.3凝胶卡操作步骤 (1)撕开微柱凝胶配血卡上端的锡纸膜，露出所需检测的孔数；(2)在A、B、RhD孔中分别加入红细胞悬液50ul； (3)将卡放到L X J-1专用离心机中离心5分钟；(6)离心结束后在浅色背景下观察结果。 1.4A B O血凝法血型正定型检定操作步骤 (1)在血型卡上，标明A孔、B孔、D孔，分别加入待检1％ 的红细胞悬液各一滴；(2)在A孔、B孔、D孔中分别加入抗A、抗B、抗D血清各一滴；(3)将卡放到振荡仪中振荡混匀1分钟，采用目视法观察结果。 2 卡式法结果判定 (1) 阴性结果:红细胞完全沉于凝胶管底部,表明受血者与献血者配血相合。 (2) 阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者配血不相合。 3 结果 （1）A B O血型定型350例中两种方法检测结果完全相同，但其中3例血凝法凝集效价（++）；卡式法凝集效价（+++）；（2）RhD血型定型350例中两种方法结果一致。AB O、R hD血型定型卡式检测方法与血凝法比较具有安全可靠，操作简单，试验结果准确，易判断等优点。 4 讨论 A B O、R h D血型定型传统的方法是血凝法，特点是操作便，设备简单，缺点是影响因素多，灵敏度低；目前微柱凝胶免疫检测技术，在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床，在AB O血型鉴定、R H血型鉴定、不规则抗体检测、鉴定和交叉配血以及新生儿溶血等检测项目中广泛应用,我院于2010年采用了此种血型检测方法，在实际应用中取得了较好效果。 卡式血型检测方法的优点：（1）实验全过程标准化 标准化的孵育时间、离心时间以及结果判读，消除了主观因素对弱反应结果的判读，减少了人为错误的发生；(2）标本用量少 在卡式血型检测中，标本用量相对较少，仅需1%红悬液50ul加入微柱凝胶管，理论最少红细胞用量仅需0.5u l。 (3）灵敏度和准确性高，重复性好，凝胶管中的凝胶中含有细小微孔，在定时定转速条件下仅允许分散红细胞通过，如红细胞与所加血清发生特异性凝集反应，形成红细胞免疫复合物，则因其体积过大而不能顺利通过凝胶孔而不能沉集于凝胶底部。(4）结果易判断及易标准化 ，卡式血型检测结果判断标准明确，凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应；游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集。(5）实验结果客观性强，而且稳定，可以长期保存，并可拍照存档便于复查。 卡式血型检测法与血凝检测方法比较，在实验的标准化、重复性方面具有更大优势，更适合常规的红细胞血型血清学检测，通过我科一年时间的使用，受到了我科工作人员的普遍欢迎。随着医学的不断发展及对医疗安全的不断重视，相信卡式血型检测法一定会广泛的应用