- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
ADSCs在脂肪移植中的应用与研究
精品论文 参考文献
ADSCs在脂肪移植中的应用与研究
暴志国 张建文(通讯作者) 王琪影 张歌 王琰
(解放军第153医院 激光整形美容中心 450007)
【摘要】目的:探讨ADSCs在脂肪移植当中的应用与研究。方法:1利用消化法提取ADSCs(ADSCs)在DMEM完全培养液基中培养、传代,收集第3代细胞作为种子细胞。2 细胞+生物支架复合物取材、制备和植入。脂肪颗粒做为支架材料和种子细胞混合制成细胞-生物支架复合物,实验分3组:组①ADSCs按25times;106个/ml浓度与脂肪颗粒1:1混合;组②单纯脂肪颗粒;组③单纯ADSCs配制成浓度12.5times;106个/ml浓度。按每一样本0.2ml注射到裸鼠(12只,6w雄性)背部皮下,形成3个点,每组各1个点,3个月后分别取材分析。结果:三组均可见有新生组织形成, Masson三色染色染色法中三组中均可见脂肪细胞及胶原蛋白。三组中体积组①gt;组②gt;组③,质量组①gt;组②gt;组③,P值lt;0.05。RT-PCR示三组中均见到人类mRNA表达。Western blot示三组中均可见I型胶原蛋白表达。结论:ADSCs可促进局部血管形成,减少游离移植脂肪的吸收,促进局部胶原蛋白形成,在局部微环境的诱导下向脂肪细胞分化的趋势。
【关键词】ADSCs 组织工程技术 脂肪移植 胶原蛋白含量
【中图分类号】R62 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2014)17-0104-02
脂肪移植已有100多年历史,自体脂肪移植以其无排异反应,无免疫原性,可在体内长期存活等无可替代的优点备受广大求美者和医生的青睐。被广泛应用于修复体表软组织缺损。随着脂肪移植应用范围扩大其不足之处逐渐显现出来,高吸收率,可达60%~70%,移植中心部位会出现坏死纤维化、液化、钙化等现象,使脂肪移植受到一定的限制。如何减少移植脂肪细胞的液化吸收,增加成活率成了很多整形医生的研究课题。2001年,Zuk4等从游离脂肪组织中成功分离培养出具有向骨、软骨、脂肪、肌肉等多向分化潜能的细胞,人们对ADSCs有进一步的认识并迅速应用到组织工程种子细胞研究领域。ADSCs的多向分化潜能也被许多研究所证实。但是,目前对ADSCs在体内环境下的安全性、可控性尚无定论,有待进一步研究,本实验应用组织工程技术,选择脂肪颗粒为支架材料,以ADSCs为种子细胞构建种子细胞+支架复合物,移植在裸鼠体内,观察种子细胞+支架复合物在宿主体内的生长情况。
1 材料与方法
1.1试剂 II型胶原酶(美国gibco)、DMEM培养液(美国 gibco)、胎牛血清(美国HyClone)、PBS液、胰蛋白酶(北京Solarbio)、碱性成纤维细胞生长因子(北京双鹭药业)。
1.2主要器材
超声组织匀浆机、 纯水系统、恒温CO2培养箱、低温台式离心机、精密天平、恒温摇床、倒置相差显微镜、超净工作台、培养瓶、离心管、脂肪抽吸针等。
1.3实验动物:BALB/c Nude裸鼠,12只5w龄,雄性,有北京维通利华实验动物技术有限公司提供,在河南省动物实验中心饲养。
1.4细胞培养
脂肪组织来源于吸脂塑型的求美者。抽取部位为双下肢股外侧及股后侧脂肪。以消化法提取ADSCs,取第3代细胞作为实验种子细胞。将ADSCs配置成25times;106个/ml浓度备用。
1.6 干细胞表面标志物鉴定:
ADSCs是一组来源于脂肪组织的混合干细胞群,流式细胞仪测定细胞表面抗原简单,易于操作,灵敏可靠。
1.7 ADSCs移植
抽取股外侧脂肪,去红细胞,脂肪颗粒与ADSCs混合制成细胞-生物支架复合物。实验分3组:组①ADSCs按25times;106个/ml浓度与脂肪颗粒等体积混合;组②单纯脂肪颗粒;组③单纯ADSCs。按每一样本0.2ml注射到裸鼠(12只,6w雄性)背部皮下,3个月后取材检测分析。
1.8 Masson三色染色法
Masson三色染色法印染标本组织,明确组织成分。读片:胶原蛋白呈蓝色,脂肪呈空泡状,肌肉组织呈红色,细胞核呈紫红色。
1.9 通过RT-PCR测定新生组织染色体 ZFXmRAN
收集标本,提取RNA,纯化。采用Gel Doc 2000凝胶图像分析仪采集图片,Quantity One分析软件对条带进行分析,基因编码区的引物序列由,有上海捷瑞生物工程有限公司设计合成。
上游引物ZFXsense5rsquo;-AAGGTTCCCCTGGACGAGAC-3rsquo;
下游引物ZFXantisense
您可能关注的文档
- 1例玫瑰花饼过敏患者的抢救及护理体会.doc
- 1例特殊胎膜早破患者的护理.doc
- 1例特重度烧伤合并肺出血的护理.doc
- 1例甲状腺舌管囊肿及瘘管患者围手术期护理.doc
- 1例留置尿管拔管困难病例的护理体会.doc
- 1例瘢痕子宫破裂的术中抢救配合.doc
- 1例破伤风患者的护理 樊存存 田文娟.doc
- 1例白塞氏病的护理体会.doc
- 1例百草枯中毒患儿的抢救护理.doc
- 1例神经外科术后静脉留置针断裂报道及原因分析.doc
- AHP法在子宫内膜异位症治疗药物优选中的应用.doc
- AIDS患者合并CMV性视网膜炎首诊眼科1例.doc
- Al2O3-ZrO2复合膜制备的初步研究.doc
- ANCA相关性肺血管炎误诊为肺炎的2例报告.doc
- APACHEⅡ评分系统在ICU护理人力资源配置中的应用.doc
- APN排班模式对基层医院夜班护士焦虑抑郁状态及睡眠质量的影响.doc
- APACHEⅢ、SAPSⅡ、MPMⅡ_0与APACHEⅡ在急诊内科危重病人病情评估中的比较.doc
- APACHEⅡ评分系统对重型老年多器官功能不全综合征患者的临床意义.doc
- ApoE基因多态性与脑血管病.doc
- ATG治疗再生障碍性贫血护理措施及过敏性休克防治.doc
文档评论(0)