SEROZYME磁分离酶联免疫检测系统测定血清C肽、胰岛素及其临床评价.docVIP

精品论文 参考文献 SEROZYME磁分离酶联免疫检测系统测定血清C肽、胰岛素及其临床评价 崔钟鑫 苏中翰 刘学君 (黑龙江省森工总医院检验科　150040) 【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）27-0050-02 【摘要】 目的 磁分离酶联免疫(磁酶免——MAIA)测定内分泌激素是近年来从国外引进的一种非放射性标记高敏感免疫检测系统。结合临床实践需求，考核MAIA测定技术的准确性和可比性。方法 对60岁以下Ⅱ型糖尿病30例和非糖尿病30例用MAIA测定其血清基础C-肽(C-P)和基础胰岛素(INSULIN)水平。结果 糖尿病组基础C-P高于非糖尿病组，二组呈偏态分布，Plt;0．05．有差异。二组的基础INSULIN，Pgt;0．05，无差异。结论 Ⅱ型糖尿病患者存在高C-P血症，MAIA方法测定C-P，INSULIN有其准确性和可比性。 【关键词】MAIA　C-P　INSULIN SEROZYME系统MAIA测定内分泌激素在国外已应用多年，近几年被国内引进。为考核其准确性与可比性，做了Ⅱ型糖尿病与非糖尿病二组间的基础 C-P与基础INSULIN测定与对比。 1研究对象 选自在我科就诊的60岁以下的Ⅱ型糖尿病和非糖尿患者各30例。 2方法和材料 2.1标本 取3.0mL静脉血至试管中，不加添加剂，在室温下凝结、离心，分离血清部分，于2～8℃贮存血清标本，稳定24h，若需长期保存，-20℃可保存30天(避免反复冻融)。 2.2标准品 A、B、C、D、E、F，6个标准品，做标准曲线时使用。 2.3试剂 二种抗C-P和抗INSULIN单克隆抗体(一种酶标单克隆抗体(Anti-ALP)，另一种荧光素标记的单克隆抗体(Anti-FITC))、SEROZYME磁分离试剂0.6％、SEROZYME清洗浓缩液、SEROZYME基质液，SEROZYME终止液，SEROZYME对照液。 2.4仪器 磁分离器及SEROZYME-Ⅱ型酶联免疫测定仪由北京倍爱康生物技术有限公司提供。 3方法及原理 该方法是酶联免技术与磁性微粒分离技术相结合的一种测定法。使用了二种高亲和力的单克隆抗体。酶标单克隆抗体，荧光素标单克隆抗体分别与标本抗原的不同部位结合，形成夹心三明治免疫复合物。磁性微粒联接的抗荧光素抗体与免疫复合物中的荧光素结合，形成聚合物，此??合物在磁场的作用下分离，分离后聚合物中酶的含量与标本抗原量成正比，加底物后测定酶促反应呈色，可计算出标本抗原含量。 4结果 见表1。(略) 5结论 Ⅱ型糖尿病组存在高C-P血症，有可能存在高胰岛素血症，MAIA方法测定有其可比性和准确性。 6讨论 Ⅱ型糖尿病的发病原因除遗传、环境因素以外，另一个重要的病因就是胰岛素抵抗(高胰岛素血症和胰岛素分泌缺陷)。本文糖尿病组C-P基础值高于非糖尿病组可能就是这一因素的原故。测定INSULIN，C-P是检查beta;细胞功能的主要内容，因为beta;细胞中先合成前胰岛素元很快分解为胰岛素元最后分解为等分子量的INSULIN和C-P，二者之间无交叉反应。在血中二者之间比值恒定，而且C-P不受外源的胰岛素与胰岛素抗体的影响，故测C-P可以完全反应胰岛素水平，也就是说测C-P的意义比INSULIN大。本文结果表明二组的C-P有差异，而且IN- SULIN无差异的主要原因可能就在于此。测C-P可用于Ⅰ、Ⅱ型糖尿病的诊断，判断Ⅱ型糖尿病患者是否需用胰岛素治疗，用于酮症酸中毒患者以及各种低血糖的原因鉴别。临床中不仅要考虑胰岛素的水平，更应考虑C-P的水平。由于C-P在肾脏裂解，尿C-P可反应一段时间内的平均水平，比血C-P的意义更大，可以考虑应用MAIA技术开展尿C-P的测定。经广泛研究免疫活性INSNLIN和免疫活性C-P不够特异。需要建立前胰岛素和真胰岛素及其中间代谢产物C-P附产物的测定方法，在测定中也提示C-P比INSULIN的意义明显。总之，越来越多的理由和实践经验显示beta;细胞功能测定的准确性和实用性C-P比INSULIN优越。磁酶联免疫测定技术在国外已应用多年，近几年引进国内，由于它无放射性及其危害，对实验室条件要求低，磁分离不用离心，液相反应灵敏准确，可代替放免，检测速度快，比较适用于中小型医院专业科室。因具有临床需求量大等优点，在国内开展很快，我科已开展了七项内分泌激素的测定