木质纤维素生物质的酶法糖化.pptVIP

This procedure describes the enzymatic saccharification of cellulose from native or pretreated lignocellulosic biomass to glucose in order to determine the maximum extent of digestibility possible. A saturating level of a commercially available or in-house produced cellulase preparation and hydrolysis times up to one week are used. 一、简介： 本实验描述，天然纤维素酶糖化或预处理木质纤维素生 物质为葡萄糖，以确定可能的最大消化率,一个在商业内部最高水平制备及水解纤维素酶所使用时间最长不超过一周。 一、范围 ： 本过程适用于木质纤维生物质。如果生物质中可能含一些淀粉，以干重量百分比去计算纤维素总葡聚糖时必须纠正为以淀粉含量减去总干重量葡萄糖的百分比； 所有分析的进行要按照一个适当的、具体的实验室质量保证计划（二次分配）。 二、术语： 生物质的预处理：生物质被化学或热量改变结构组成； 纤维素酶：一种酶的制备显示有三个纤维素阶段：远藤- 1 ,4 -β-的D -葡聚糖酶，外切- 1 ,4 -β-葡萄糖苷酶和β-的D -葡萄糖苷酶，它们在不同纤维素制备中出现活动程度不同。 三、意义和使用： 1 The maximum extent of digestibility is used in conjunction with other assays to determine the appropriate enzyme loading for the saccharification of biomass 2 This procedure can also be used to measure the efficacy of a given pretreatment based on a maximum enzyme loading 1 最大程度的消化率是用于与其他实验结合，以确定生物质糖化适当的酶量； 2 此过程也可以用来衡量一个最大的酶量为基础的特定预处理效果。； 四、干扰： 1 Test specimens not suitable for analysis by this procedure include acid- and alkaline-pretreated biomass samples that have not been washed. Unwashed pretreated biomass samples containing free acid or alkali may change solution pH to values outside the range of enzymatic activity; and the unwashed glucose in the biomass may influence the final result. 2 Air drying of biomass samples prior to saccharification may have an impact on the maximal conversions achieved. 1 此分析过程不适合的试验样品，包括还没有被酸和碱预处理洗过的生物样本。没洗过的生物质预处理样本含有游离酸或碱，可能会改变溶液的pH值，超出酶活性适用范围，以及在生物质中未洗的葡萄糖可能会影响到最终的结果； 2 空气干燥的生物质相对于糖化的样品，可能对转换的影响达到最大。 七、步骤: 1 对所有含有纤维素的被消化的样品执行LAP “生物物质中的总固体的测定”。注：所有已发生了一些水预处理木质纤维原料绝不能在风干之前进行酶消化，因为微观生物量结构可能会发生不可逆转的孔隙崩溃的导致从纤维素中释放的血糖酶降低。 2 称取样品，其数量相当于0.1克纤维素或0.15克总在105oC干重生物量主要成分（样品的纤维素含量初步认定为经由LAP-002测定的葡萄糖量，减去目前任何淀粉贡献，LAP-016），并添加到20毫升的玻璃小闪烁瓶。 3 为每小瓶中，添加5.0毫升0.1M，pH值4.8的柠檬