癌胚抗原.pptVIP

- * - CEA检测技术的研究 肿瘤标志物癌胚抗原 04 展望 01 癌胚抗原简介 02 癌胚抗原的临床意义 03 癌胚抗原的检测技术 Transition Page 过渡页 04 展望 01 清晰的内容设定 02 癌胚抗原的临床意义 03 癌胚抗原的检测技术 01 清晰的内容设定 01 癌胚抗原简介 01 简介 癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA）是一种存在于结肠癌、正常胚胎肠道、胰腺和肝内的一种蛋白多糖复合物，分子量为180~200kDa。可广泛存在于内胚叶起源的消化系统癌，也存在于正常胚胎的消化管组织中，在正常人血清中也可有微量存在。 癌胚抗原是一个广谱性肿瘤标志物，它能向人们反映出多种肿瘤的存在，对大肠癌、乳腺癌和肺癌的疗效判断、病情发展、监测和预后估计是一个较好的肿瘤标志物，但其特异性不强，灵敏度不高，对肿瘤早期诊断作用不明显。 Transition Page 过渡页 04 展望 01 癌胚抗原简介 02 巧妙的母版设计 03 癌胚抗原的检测技术 01 02 癌胚抗原的临床意义 02 临床意义 结肠癌患者70%～90%显示CEA高度阳性，血清CEA水平变化与结肠癌Duke分期密切相关 其他消化道肿瘤也可检测到CEA阳性，如：大肠癌患者可达65%-75%的阳性 肠道炎症、肾功不全、结肠息肉、肝硬化、慢性肝炎、闭锁性黄疸等也可导致CEA水平增高 妊娠、大量吸烟也可引起CEA水平增高 　 总之：CEA并非一种癌的特异性抗原，而是癌的一种相关抗原，缺少特异性，不能作为肿瘤的筛选指标，而是用于肿瘤患者的监测，疗效的判断 Transition Page 过渡页 04 展望 01 癌胚抗原简介 02 癌胚抗原的临床意义 03 简单的展示思路 01 03 癌胚抗原的检测技术 03 检测技术 癌胚抗原 测定CEA含量的方法 传统 经典 免疫分析法 基于抗原-抗体的专一性和灵敏性 免疫荧光技术 放射免疫技术 免疫酶技术 癌胚抗原 目前临床上用来检测CEA浓度的主要方法 酶联免疫吸附测定 荧光免疫测定 放射免疫测定 电化学发光免疫测定 安培免疫测定 免疫金标技术 间接法 双抗体夹心法 竞争结合法 荧光偏振免疫测定 时间分辨荧光免疫测定 酶联荧光免疫测定 核素分析的高灵敏度结合抗原-抗体反应的高特异性 灵敏的化学发光分析 特异的免疫测定 电化学信号的变化 胶体金为标记物 03 检测技术 荧光免疫测定 fluoroimmunoassay, FIA 荧光偏振免疫测定 时间分辨荧光免疫测定 酶联荧光免疫测定 分析 速度快 FIA 应用范 围窄 灵敏度 不高 03 检测技术 03 检测技术 时间分辨荧光免疫测定 主要原理 时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是一种新型的免疫分析技术，与一般的免疫荧光法不同，它所采用的示踪剂是镧系稀土元素铕(Eu) 将镧系元素铕（Eu）螯合物作荧光标记物，利用这类荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地消除非特异性本底荧光的干扰，最大限度的提高了测定方法的特异性和灵敏度。 检测仪器 ▲ 时间分辨荧光计与一般的荧光分光光度计不同，采用脉冲光源（每秒闪烁1000次的氙灯），照射样品后即短暂熄灭 ▲ 以电子设备控制延缓时间，待非特异本底荧光衰退后，再测定样品发出的长镧系荧光 ▲ 检测灵敏度可达0.2～1ng/ml 03 检测技术 时间分辨荧光免疫测定 03 检测技术 时间分辨荧光免疫测定 检测步骤 抗原与包被的抗体发生 特异性结合 游离的用镧系元素标记的抗体与抗原发生特异性的结合 用时间分辨技术测量荧光 1 2 3 03 检测技术 时间分辨荧光免疫测定 检测步骤 在包被孔中有抗体被包被在孔的内表面，加入血清后，震荡使抗原抗体完全结合，洗涤并甩干 在包被孔中加入游离的用镧系元素标记的抗体，此抗体与已经结合在孔表面上的抗原相结合，这样镧系元素就通过一个“双抗夹心”化合物被固定在包被孔的表面，被固定的镧系元素的量与抗原的量成一定的比例关系，洗涤除去未反应的游离的标记抗体 荧光的强弱与镧系元素的量成正比，因此与抗原的量也呈正比，这样可以测出血清中癌胚抗原的含量 - * -