第十一章G-微需氧和厌氧菌.pptVIP

第二节 梭菌属 一、属的特性 厌氧芽孢杆菌，芽孢呈卵圆形或圆形，直径大于菌体，使菌体膨大呈梭形，故得名。大多数有鞭毛（魏氏梭菌除外），无荚膜（魏氏梭菌除外），G+。 二、分类及所致疾病 本属有80个种，多为非致病菌，常见致病菌约为11种。 三、疾病类型及诊断原则 疾病类型有5大类。 1．气肿疽与恶性水肿：急性败血症且有气性水肿症状。 气肿疽：气肿疽梭菌引起，经消化道感染。 恶性水肿：病原复杂，动物（腐败梭菌）、人 （A型产气荚膜梭菌）。 诊断原则：病原菌的检查。 2．羊快疫、羊猝狙、肠毒血症、黑疫、细菌性血红素尿：均为毒血症。 （1）羊猝狙：C型魏梭菌引起。 （2）肠毒血症：B型魏氏梭菌引起。 这两个病，细菌不一定侵入体内，而在肠道中产生毒素，故微生物诊断主要靠肠内容毒素检查（查毒素） （3）羊快疫：腐败梭菌经消化道感染，进入血液造成败血症，主要检查病原。 （4）黑疫：B型诺维氏梭菌 （5）细菌性血红素尿：溶血梭菌此二菌存在于肝脏，当肝受损时，乘机繁殖，产生毒素致病，主要查病原，次要查毒素。 3．羔羊痢疾，犊牛痢疾，人禽的坏死性肠炎 由魏氏梭菌在肠道内产生毒素所致，细菌不一定侵入体内，主要查毒素。 4．人畜的肉毒中毒、人魏氏梭菌食物中毒：均由病原菌在食物或饲料中生长繁殖，产生毒素被食入而中毒。 肉毒症：主要检查肉毒毒素，其次细菌学检查。 魏氏梭菌食物中毒：可疑食物分离细菌，并测定其 毒素产生能力。 5．破伤风：破伤风梭菌经伤口感染，产生破伤风毒素引起，症状极为特征“木马状”，不需微生物诊断。 四、梭菌属分离鉴定应注意事项 1．专性厌氧，必须采用厌氧培养物。焦性没食子酸法、共栖法，肝块肉汤、铁钉牛乳。 2．培养基必须是新鲜配制，厌氧条件下保存。 3．梭菌在培养基表面蔓延生长，不易得到单个菌落，为了得到单个菌落，可将琼脂量加到4~6%（一般2%），或划线接种后在表面再加注一层琼脂培养基，以限制其蔓延生长。 4．污染严重时，80℃ 20min杀死杂菌，25℃下培养。 5．腐败梭菌，魏氏梭菌容易在死后侵入动物体，而诺维梭菌、溶血梭菌存在正常动物体内，故从动物体分离出这些梭菌，并不能肯定它们就是病原，应进行毒力测定。 产气荚膜梭菌 旧名：魏氏梭菌，自然界分布广，可见于污水，土壤，饲料，食物及人畜肠道中，一定条件下，引起多种严重疾病。 （一）形态染色特征 G+粗大正直杆菌，单在或成双排列，无鞭毛，一般条件下培养芽孢很少产生，有荚膜。 （二）培养特性 厌氧要求不高，普通培养基上易生长。 1．葡萄糖血平板：圆形，光滑，隆起，淡灰白色中等大小菌落，有的可形成圆盘形边缘呈锯齿状，表面有辐射状条纹的“勋章”样大菌落，产生“双重溶血环”内环β溶血，外环为α溶血。 2．肝块肉汤：5-6h，均匀浑浊，产生大量气体。 （三）生化特性 1．牛乳暴烈发酵：魏氏梭菌接种牛乳培养基8-10h后，发酵牛乳中的乳糖使牛乳酸凝，同时产生大量气体使凝块变多孔的海绵状，严重时，被冲成数段，甚至喷出管外。 2．明胶液化，糖发酵⊕ H2S+ 吲哚－ HNO3－ （四）型别及病原性 据毒素将该菌分为5个型：A，B，C，D，E A型产气荚膜梭菌：引起人畜气性坏疽，食物中毒，牛、羔羊、仔猪、兔、肠毒血症。 B～：羔羊痢疾，其它动物肠毒血症。 C～：绵羊猝狙，还有肠毒血症及坏死性肠炎。 D～：羔羊，绵羊，牛肠毒血症。 E～：犊牛，羔羊肠毒血症，但很少发生 （五）微生物学诊断 细菌学诊断意义不大，因为魏氏梭菌是人畜肠道中常见菌，或者死后被侵入，从病料中检出该菌并不能说明它就是病原。必须进行肠内容物毒素检查。 1．方法： 回肠内容物→加适量灭菌生理盐水作1-3倍稀释→离心取上清， 滤过除菌→滤液静脉注射家兔（1-3ml），小鼠（0.1-0.3ml） →数分钟至10小时内死亡，证明有毒素存在。 2．为了进一步证明是否为魏氏梭菌毒素及毒素型，必须进行毒 素中和试验。 方法：上述滤液3份。 I+C型魏氏梭菌抗毒素血清 Ⅱ+D型魏氏梭菌抗毒素血清 37℃作用40min→静脉注射小鼠或兔子 Ⅲ+生理盐水 观察12h, 记录结果如下： D型抗毒素血清可保护 C型抗毒素血清也可保护————A型毒素 C型抗毒素血清不能保护————D型毒素 D型抗毒素血清不保护 C型抗毒素血清可保护————B型或C型毒素 C型也不保护————可能是E型或不是魏氏梭菌毒