第八节 分枝杆菌属.pptx

第八节 分枝杆菌属Mycobacterium 主要特征 细长稍弯的G+杆菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名。 细胞壁含有大量脂质成分（分枝菌酸） 不易着色，加热后着色，但一经着色则有抗酸性，不易脱色，能抵抗盐酸酒精的脱色，故采用抗酸染色，故又称抗酸杆菌 生长缓慢，营养要求高 无鞭毛、无芽孢、不产毒素，其致病性与菌体成分有关 所致疾病多为慢性且伴有肉芽肿分枝杆菌的分类 分类生长特性主要对人致病的分枝杆菌结核分枝杆菌复合群生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌非结核分枝杆菌Ⅰ组生长缓慢、光产色堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌Ⅱ组生长缓慢、暗产色瘰疠分枝杆菌Ⅲ组生长缓慢、不产色鸟-胞内分枝杆菌Ⅳ组生长快速、偶发分枝杆菌麻风分枝杆菌人工培养基上不生长一、结核分枝杆菌（M.tuberculosis) 1882年， Koch首先在结核病灶中发现了一种细长略带弯曲的杆菌━结核杆菌，开创了结核病研究的新记元，获得诺贝尔医学与生理学奖。 结核分枝杆菌（M.tuberculosis) 引起结核病的病原体；结核病是重要的再现传染病 可侵犯全身各器官，但以肺结核最多见 目前，新病例900万/年，死亡300万例/年，95% 在发展中国家。 我国，发病率及死亡率均排前5，死亡25万例/年具有强烈传染性的慢性消耗性疾病 估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。迄今因结核病死亡人数已达2亿 我国是世界上22个结核病高负担国家之一目前我国拥有结核病人数在世界上排名第二位，中国内地现有结核病患者约500万人，每年新增病例150万人，约有13万人死于该病，这一数字超过了中国全部传染病死亡人数的总和。（一）生物学特性形态染色培养特性抵抗力变异性1、形态与染色细长微弯，端极钝圆，大小1～4X0.3～0.5um呈单个或分枝状排列，排列不规则。细胞壁脂质含量较高，特别是有大量分枝菌酸抗酸染色(acid-fast bacilli)：呈红色，阳性L型菌：Much颗粒无荚膜、无鞭毛、无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中，形态常不典型，可呈颗粒状、串珠状、短棒状、长丝形等。原理：细胞壁中含大量的脂质，尤其是其中的分枝菌酸（mycolic acid）影响染料的渗透，且一旦着色便可抵抗盐酸酒精的脱色作用 涂片、固定、干燥初染：以5%石炭酸复红加温染色后可以染上脱色：用3%盐酸乙醇不易脱色复染：美蓝染液干燥、镜检分枝杆菌呈红色，而其他细菌和背景中的物质为蓝色。 齐-尼氏抗酸染色法 Ziehl-Neelsen method for acid fast bacteria结核杆菌痰涂片抗酸染色 X1000结核分枝杆菌在体内外经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的合成，异烟肼影响分枝菌酸的合成，巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌后溶菌酶的作用可破坏肽聚糖，均可导致其变为L型，呈颗粒状或丝状。异烟肼影响分枝菌酸的合成，可变为抗酸染色阴性。这种形态多形染色多变在肺内外结核感染标本中常能见到。临床结核性冷脓疡和痰标本中甚至还可见有非抗酸性革兰阳性颗粒，过去称为Much颗粒。该颗粒在体内或细胞培养中能返回为抗酸性杆菌，故亦为L型。细菌型L型结核杆菌丝状型颗粒型培养特性专性需氧最适pH6.5-6.8最适温度：37℃，低于30C不生长生长缓慢：代时18h，2-4W形成R型菌落营养要求高罗氏培养基：甘油、天门冬素、蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔雀蓝液体培养基呈粗糙皱纹状菌膜或索状生长 吐温-80 (Tween 80) 菌落乳白色或米黄色，干燥不透明，呈颗粒状、结节状或花菜状罗氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基罗氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基，内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿等。孔雀绿可抑制杂菌生长，便于分离和长期培养。蛋黄含脂质生长因子，能刺激生长。根据接种菌多少，一般2～4周可见菌落生长。菌落表面粗糙呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。液体培养时，因结核分枝杆菌胞壁中含大量类脂，疏水性较强，细菌易聚在一起，加之专性需氧，故呈菌膜生长。若加入吐温－80（Tween-80），可降低细菌表面的疏水性，使细菌分散均匀生长，有利于结核分枝杆菌的初次分离培养和药物敏感试验等。在液体培养基中可能由于接触营养面大，细菌生长较为迅速。一般1～2周即可生长。临床标本检查液体培养比固体培养的阳性率高数倍。生化反应不发酵糖类 合成烟酸和还原硝酸盐（与牛分枝杆菌鉴别）热触酶实验阴性（与非结核分枝杆菌鉴别） 检查方法是将浓的细菌悬液置68C水浴加温20min，然后再加H2O2。观察是否产生气泡，有气泡者为阳性。触酶试验阳性3.抵抗力结核分枝杆菌因细胞壁中含大量脂质，故对某些理化因素有较强的抵抗力。①抗干燥：脂质可防止菌体水分丢失，在干燥痰中可存活6～8个月，附着在空气的尘埃中传染性可保持8～10天；