酒曲生料发酵制胶废水生产单细胞蛋白的研究.pdfVIP

酒曲生料发酵制胶废水生产单细胞蛋白的研究 杨劲松* 谭海生 (华南热带农业大学工学院食品系 海南儋州 57 1737) 摘要 应用正交试验设计法 以制胶废水为主要原料 选用酒曲为菌种来源进行生料发酵生 产单细胞蛋白 通过对乳清摇瓶发酵条件包括糖含量 培养时间 接种量的优化 以便在最 佳的发酵条件下获取最多的单细胞蛋白 结果表明 发酵的最佳条件为 糖含量8g/100mL(蔗 糖) 培养时间72 小时 接种量2%(酒曲) 在此条件下 所产的菌体粗蛋白含量为5. 16% 菌体生物量(湿重)为79.20g/L 发酵液的pH 值为3.8.其发酵液可作为生物凝固剂凝固胶乳 减少凝固用酸的量 关键词 制胶废水 酒曲 生料发酵 单细胞蛋白 正交试验设计 单细胞蛋白(scp)[1]是一种通过工业方法增殖培养单细胞生物 如微型藻类 非病原细菌 酵母 担子菌 霉菌等 而获得的菌体蛋白 近年来 由于人口的增多以及城市化的发展 耕地面积不断减少 粮食和饲料的生产面临着巨大的压力 从微生物中获得蛋白质(单细胞 蛋白)是解决人类蛋白质食物资源的一条重要而有效的途径 由于微生物生长繁殖快 世代 周转迅速[2] 对营养物质适应性强 可以利用农副产品废弃物 糖蜜 谷氨酸 发酵废液 稻草 稻壳 玉米秸 食品厂废液 废渣 纸浆废液等都可以作为培养微生物的材料 以达 到综合利用的目的 我国天然橡胶年产量为50 万吨左右 天然胶乳经加工成标准胶或浓缩胶乳过程便产生 制胶废水 制胶废水含有糖类 蛋白质 氨基酸 白坚木皮醇 类脂物 胡萝卜素 有机盐 和无机盐[3] 制胶废水流出数量大 其直接排放将严重影响和破坏环境 但是 用制胶废水 生产单细胞蛋白(SCP)还未见报道 用制胶厂废水生产 SCP 其既能缓解开发饲料资源中蛋 白质资源缺乏的问题 又能利用废弃物资 变废为宝 保护环境 增加经济效益 一举数得 具有广阔的经济前景和深远的社会意义 这就是本研究的目的所在 本文研究了利用酒曲中的微生物生料发酵制胶废水而获得单细胞蛋白的发酵条件 即制 胶废水无需灭菌 经酒曲发酵而获得单细胞蛋白 酒曲中不仅含有多种微生物如根霉 毛霉 酵母 细菌等 并且价格低廉易获得 胶乳乳清是天然橡胶在初产品加工过程中的一种工业 废水 其具有微生物生长的多种营养物质 但其所含营养物质的碳源 氮源等比例不协调 本研究不仅可以解决粮食和饲料问题 同时也可以解决工业废水问题 具有双重效果 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1 材料 酒曲(市售) 蔗糖(市售) 制胶废水 胶乳乳清 采于海南两院西培橡胶加工厂 1.1.2 培养基 胶乳乳清加适量蔗糖 1.1.3 化学试剂 盐酸(AR) 氢氧化钠(AR) 浓硫酸(AR) 硼酸(AR) 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 硫酸钾 硫酸铜 AR 为分析纯 其它均为化学纯* i 1.1.4 实验设备 H QL-150A 型恒温摇床 中国科学院武汉科学仪器厂 LD4-2A 型低速离心机 北京医用离心机厂 LS-B50L 型立式压力蒸汽灭菌锅 上海医用核子仪器厂 恒字牌电热恒温鼓风干燥箱 上海跃进医疗器械厂 Delat320 型pH 计 Mettler-Toledo-Group 常量凯式定氮消化 蒸馏装置 1.2 实验方法 1.2.1培养方法 在500 mL 三角瓶中装入100 mL 胶乳乳清 在其中加入2g 蔗糖 并接种2%酒曲(相对于 摇瓶装液量 下同) 于室温 180 r/min 摇瓶发酵培养 培养时间分别为 64h 每个处理组 合做3 次重复试验 1.2.2 菌体生物量的测定[4] 事先将离心管用电子天平称称重(皮重) 然后取 50 毫升的发酵液 以 3000r/min 离心 30min 再用去离子水洗2 次 再离心 弃上清夜 用滤纸吸干管壁上的水分 由此计算生 物量(湿重g/l) (总重-皮重)×1000/50 1.2.3 粗蛋