转录介导的扩增技术及其在诊断中的应用.pdfVIP

具有无限增殖和肿瘤再生能力，将这些细胞称为“乳腺癌干细胞”，其具有组织干细 胞的自我更新和分化特征，自我更新促使肿瘤发生，而分化则有助于肿瘤表型异质化。 乳腺癌最明显的特征是包含许多不同的亚型。基于肿瘟于细胞学说，乳腺癌不同亚型 的遗传异质性，部分上是源于乳腺癌干细胞的不定向分化，从而产生具有不同遗传异 质性的子代。 对于一些肿瘤药物能够快速减少肿瘤的大小，却不能完全杀灭肿瘤和预防复发， 肿瘤干细胞学说提供一种呵能的解释。绝大多数有效的化疗药物都通过干扰细胞周期 对增殖活跃的细胞产生影响，而对于生命周期长、分裂慢以及可以长时间处于休眠状 态的嚣申癌干细臌通常可以逃避化疗药物的杀伤，同时还有利于药复发突变的累积。赢 且，肿瘤干细胞通常高水平表达ABC通道，特别是ABCG2，它还能使肿瘤获得更多化 疗药物抗性。所以，依据肿瘤干细胞学说应该选择肿瘤干细胞作为治疗靶点，而不是 快速地增加肿瘤细胞的死亡。 现在已知几条传统的信号通路对乳腺癌干细胞自我更新和分化非常重要，即： 几种乳腺癌细胞系中超表达，结采导致p16和P19Arf下调，丽p16下调在早期乳腺 腺癌的预后较差摆关。Wnt因子的活性转化与它蜘诱导翼腺祖细胞的聚集能力相关。 ’ 已经与一些包括乳腺癌在友的常见癌症联系趁来。 卢圣栋，博士生导师，教授，生物化学与分子生物学专业。 转录介导的扩增技术及其在诊断中的应用幸 一 。‘毛 高闪电 常惠芸 独军政 丛国正 邳军军 林1’彤， (中国农业科学院兰州兽医研究所圈家口蹄疫参考实验赛家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部畜禽病毒学重点开放实验室 兰州730046) mediated ·国家“t一五”重大科技支撑计划(编号：2006BAD06A14，2006BAD06A17) 44 ampl 增RNA或DNA的系统，其原理是带有T7RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物 (Promoter 活性水解形成单链DNA，然后与引物2退火，通过反转录合成双链DNA，在T7RNA聚合酶 列扩增1010左右。RNA产物可用杂交保护试验(hyb“dizationprotectionassay，HPA) 对进行检测，其原理为丫啶翁酯(acridiniumester，AE)标记的D冀A探针与产物中的 靶序列杂交后，探针上的AE为DNA双螺旋所保护而不被水解，其化学发光强度与靶核酸 kinetic 中制备、TMA、HPA和二重动态检测法(dualassay，DKA)等程序，该系统在 核酸提取过程中除去了一些抑SUTMA反应的因子，减少了截阳性率。采震了DKA检测方法， 该方法用两种光动力曲线不同的AE探针，因此可用于两种不同的核酸的检测。Gen- 效率，该系统有望取代手工和半自动操作的第一代TMA系统。 TMA是比较敏感的核酸扩增技术，其检测沈较简便，适合高通量筛选，在入类自缩 胞抗原等位基因分型、细菌和病毒的快速检测中发挥了重要作用。相关研究证明TMA与 PCR-SBT等相互结合，已经取得了比较满意的结果。TMA已成功用于沙眼衣原体、淋病双 球菌和肺结核分支杆菌的检测，且检测沙眼衣原体与结核分枝秆菌的试剂盒已得到美国 tuberculosisdirect FDA批准上市。目前Gen-Probe公司开发出MTD(myeobacterium direct assy)和E—MTD(enhancedamplifiedmyeobaeteriu嫩tuberculosisassy)两 类检测结核分枝杆菌rRNA的TM