蛋白激酶Ca对小鼠胚胎干细胞定向分化中的发育基因表达作用的研究.pdfVIP

·258· ScienceResearch 生命科学研究Life 蛋白激酶Ca对小鼠胚胎干细胞定向分化中的 发育基因表达作用的研究① 高前应，葛 坚，王智崇，陈慧怡，黄丹平，袁钊辉 (中山大学中山眼科中心，广东510060) [摘 要]目的：探讨蛋白激酶巴(PKC。)对小鼠胚胎干细胞(Es细胞)定向诱导分化中发育基因 4d，形成胚胎体，再分别种植于预置有盖玻片的6孔板扣直径为100mm的培养皿，经5×10-7 和14 况，并观察了PKC激活剂佛波酯(PMA)和PKC抑制剂肛鞘氨醇对它们表达的影响。结果：免疫 组化发现在诱导后第3 d d逐渐升高，至第14d恢复至正常水 PKQ，pax-6和netrin-1的mRNA表达急剧下降，第3～7 胞中的表达增强，而n鞘氨醇的作用相反，使它们的表达明显降低，而对slit-2无明显影响。结 过PKC。信号通路起作用，其机制还有待于进一步研究。 [关键词]胚胎干细胞；蛋白激酶C；细胞分化；发育基因 Effectof kinaseon protein C expression of indifferentiationof developmentalgenes mouse stemcellsintoneuron。likecellsinvitro embryonic GAO Zhao-hui Qian-ying，GE-jian，WANGZhi—chong，CHENHui-yi，HUANGDan-ping，YUAN Yat—sen Center，Sun 510060，China) (ZhongshanOphthalmic University，Guangzhou theeffectof kinasecon of [-Abstract]Objective：Tostudy protein expressiondevelopmentalgenes andnetrin一1indifferentiationofmouse stemcellsintoneuron-likecellsin pax-6．slit一2 embryonic vitroinan tOelucidatetheirrolein wereincubatedto attempt signaling．Methods：ES-BALB／c．cells fom bodiesintheESconditionedmediumfor4d．thenwere onto 6-well embryoic platedseparately culturedishescoated for 100mmdishesforRT—PCRas— immunohist