钛合金表面原位自生钛酸钾生物薄膜的体外生物相容性研究.pdfVIP

钛合金表面原位自生钛酸钾生物薄膜的体外 生物相容性研究* 戚玉敏 崔春翔 (河北工业大学材料学院 天津 300130) 摘要：采用模拟体液培养试验、动态凝血试验及体外细胞培养试验对 Ti-15Mo-3Nb 和钛酸钾生物薄膜/ Ti-15Mo-3Nb 生物复合材料的体外生物相容性进行研究。对比试验的结果表明：(1)Ti-15Mo-3Nb 表面未见 钙磷沉积，表现为生物惰性，而呈多孔网状结构的钛酸钾生物薄膜具有很强的钙磷吸附能力，表现出很好 的生物活性；(2) 以动态凝血时间为指标，钛酸钾生物薄膜＞Ti-15Mo-3Nb ，表现出良好的血液相容性；(3) 二者均具有良好的细胞相容性，但在细胞培养初期钛酸钾生物薄膜具有更好的细胞附壁生长趋势，这将有 利于损伤部位的早期愈合。 关键词：钛酸钾生物薄膜 生物复合材料 生物相容性 生物活性 0 前言* [1] 迄今为止，用于硬组织修复及替换的材料仍然首推金属及其合金 。为了弥补金属材料在临床 [2,3] 应用中出现的问题和不足 ，人们正在采用有效的方法在金属表面涂覆生物活性涂层，从而获得具 有高强度、耐蚀性及良好生物相容性的人工种植牙、人工骨、人工关节等种植体，延长其使用寿命， 增大临床植入的成功率。 本课题组采用简单的化学处理方法在钛合金表面原位自生钛酸钾生物薄膜，该薄膜与基体形成 了牢固的化学结合。从钛酸钾生物薄膜的形貌结构、化学组成及物化性能来看，均适合作为生物活 性涂层材料。 本文通过模拟体液培养、动态凝血试验及体外细胞培养的测定，用以对该材料进行一系列的体 外生物相容性研究。 1 实验材料及方法 1.1 试验材料 试验材料为Ti- 15Mo-3Nbb 钛合金( 自制)及钛酸钾生物薄膜/Ti- 15Mo-3Nb 生物复合材料( 自制) 。 1.2 模拟体液培养 模拟体液培养试验是目前人们常用的评价材料生物活性和生物相容性的方法。试验用模拟体液 由KCl、NaCl、Na SO 、NaHCO 、CaCl 、K HPO ·3H O、MgCl ·6H O、去离子水配制而成，并用 2 4 3 2 2 4 2 2 2 [4] 三羟甲基氨基甲烷((CH OH) CNH )和1M 盐酸调节pH 值为7.4 左右，其离子浓度与人体血浆相当 。 2 3 2 试验试将材料浸泡于定量的模拟体液中放入 37℃恒温培养箱，每两天更换一次液体,并用XD685 电 解质分析仪测定培养过程中离子浓度的变化。 1.3 动态凝血试验 按中华人民共和国卫生部文件：(89)卫药字第44 号(1987)[5]之规定进行体外动态凝血时间测定。 将0.1mL 新鲜血液滴于材料表面，静置一定时间(分别为 10min、20min 、30min 、40min 、50min)后， 置于25mL 蒸馏水中，未形成血栓的自由血细胞分散于溶液中，采用UV755B 型分光光度计测量(波 * 国家科技创新重点项目(02CJ-02-02-18)。 长540nm)溶液吸光度，确定溶液的自由血红细胞相对浓度－时间的关系，并与Ti- 15Mo-3Nb 做对比 研究，以此评价材料的血液相容性。 1.4 体外细胞培养试验 骨整合的过程，即骨－种植体界面形成的过程，它涉及成骨细胞在种植体表面粘附、生长、分 化、分泌基质等连续过程。体外细胞培养试验是一种快速、简便、重复性好而又价廉的评价材料细 胞相容性的有效方法。本试验采用正常小鼠成骨细胞(OCT- 1 cells)，细胞培养基由DMEM( 高糖)培养 基(GIBI0C0 产品)+12 ％胎牛血清(天津生化制品厂)+80 单位/毫升庆大霉素( 国产)配制而成，实验过程 中采用0.3％胰蛋白酶消化液(Sigma 产品) 、10％甲醛溶液作为细胞