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化脓性球菌及厌氧性细菌
化脓性球菌及厌氧性细菌 2009.05.19 实验内容 录像:化脓性球菌 示教: 示教片:葡萄球菌、链球菌、肺链、淋球菌 产气荚膜、破伤风、肉毒 (各一张) 培养板: 血平板:金葡、白葡、链球(甲、乙、丙)、肺链 血平板:靶样溶血(产气荚膜) 试管培养:疱肉培养基(破伤风、产气荚膜)、高层琼脂断裂、汹涌发酵 操作:抗酸染色 化脓球菌 分类: 革兰氏阳性菌和阴性菌 大部分为G+菌 G-菌为: 奈瑟球菌属{脑膜炎球菌 淋球菌 葡萄球菌 金黄色葡萄球菌具有血浆凝固酶 { 金黄色葡萄球菌:周围有透明溶血环 β溶血环 白色葡萄球菌:无溶血环 葡萄球菌 G+ 链球菌 甲型链球菌:形成针尖大小菌落,周围有草绿色溶血环,是不完全溶血。 乙型链球菌:周围形成空白溶血环,是完全性溶血。 丙型链球菌:无溶血环。 链球菌 G+ Alpha溶血 Beta溶血 肺炎链球菌: 周围形成草绿色溶血环,是不完全溶血。需要和甲型链球菌相区别。 鉴别方法为胆汁溶菌实验:在胆汁中肺炎链球菌被胆汁溶解,因此培养基澄清而甲型链球菌则不会被溶解,培养基成浑浊状。 肺炎链球菌 奈瑟菌属: 使用巧克力培养板。 加入红细胞后再加入铁,破坏红细胞使培养板呈黑色。 菌落很小很细,为露滴状。 奈瑟氏菌和巧克力平板 厌氧菌 共同特点: ? 都是革兰氏染色阳性菌 ?都可生成芽孢,可根据其位置和大小来判断菌种。 破伤风杆菌:鼓槌样 产气荚膜杆菌:中间中空状 肉毒杆菌:网球拍状或汤勺状 1、破伤风:G+;芽胞位于菌体顶端,大于菌体, 使细菌呈鼓槌状;菌体细长,有周身鞭毛 厌氧菌的培养 焦性没食子酸法: 原理: 焦性没食子酸和氢氧化钠或者氢氧化钾反应消耗氧气,从而使环境中的氧被消耗掉,生成无氧环境。 孢肉培养基 新鲜牛肉绞碎 煮熟 取下部残渣即可制成孢肉。其中含有不饱和脂肪酸,在密闭环境下会消耗氧气而生成饱和脂肪酸,从而使密闭环境形成无氧环境。刚取出时为酱紫色。 厌氧血平板上的羽毛状菌落 庖肉培养基 破伤风梭菌培养基 酱紫色 破伤风杆菌 黑色 酱紫色 产气荚膜杆菌 鲜红色 产气荚膜杆菌的三个培养特点: ?高层琼脂断裂 ?汹涌发酵:使新鲜牛奶成奶酪状 ?靶样溶血:完全溶血+不完全溶血 原因为该菌含有几种不同的溶血素 2、产气荚膜梭菌:两端几乎平切的G+粗大杆菌;芽胞位于 次极端,呈椭圆形,不大于菌体;在体内有明 显的荚膜;无鞭毛 庖肉培养基 牛乳培养基-汹涌发酵 * * 示教:小白鼠接种破伤风:痉挛
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