猪传染性胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库的构建及对小鼠的免疫保护作用研究.pdfVIP

第30卷第2期 中国预防兽医学报 V01．30．NO．2 2008年2月 ChineseJournalofPreventive Medicine Feb．2008 Veterinary 猪传染性胸limB,炎放线杆菌基因组表达文库的构建 及对小鼠的免疫保护作用研究 刘慧芳，周媛媛，刘思国+，宫 强，王 勇，刘建东， 王春来，常月红，迟磊，赵 昆，云孟克 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／动物细菌病研究室，黑龙江哈尔滨150001) 摘 要：本研究应用限制性内切酶MboI消化胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组DNA，回收500bp～ 3000 I酶切位点构建重组质粒，电转化大肠杆菌TGl， bp的片段，插入到真核表达载体pCDNA3．1(+)的BamI-I 线杆菌进行攻毒，通过相对保护率、肺组织荷茵数、病理组织学3个指标测定其对小鼠的免疫保护作用。试验结 果表明，Clone pool3、Clonepool2、Clonepool6和Clone 的保护性抗原基因奠定基础。 关键词：胸膜肺炎放线杆菌；基因组表达文库；构建；保护作用 中图分类号：5852．659．5 文献标识码：A in DNAvaccinationof Protection miceinduced efficacy by ofActinobacillus expressionlibrary LIU Hui—fang，ZHOUYuan—yuan，LIUSi-guo+，GONGQiang，WANGYong，LIUJian—dong， WANG Chun—lai，CHANG Lei，ZHAOKun，YUNMeng—ke Yue·hong，CHI ofBacterial of ResearchInstitute Diseases，National Biotechnology，HarbinVeterinary (Division KeyLaboratoryVeterinary ofChinese of Sciences，Harbin AcademyAgricultural 150001，China) Abstract：TheDNAofActinobacillus 7was with1WooI to genomic pleuropneumoniae(APP)serotypedigested generate DNA of500 to3 000 were tothe vector library．Thefragments bp ligated eukaryoticexpression genomicexpression bp transformedinto EscohenchiacoliTGl resultant pCDNA3．1(+)and competent byelectroporation．Thegenomi