用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米吡啰红G核-铁蛋白的构建机理.pdfVIP

V01．31 高等学校化学学报 No．5 OFCHINESEUNIVERSmES 896—9104 2010年5月 CHEMICALJOURNAL 用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米 吡哕红G核．铁蛋白的构建机理 陈盈盈1，黄琳1，一，季学涛1，林青1，陈平1，柯才焕2，黄河清1’23 (1．厦门大学生命科学学院生物化学与生物技术学系， 2．海洋与环境科学学院，近海海洋环境科学国家重点实验室， 3．化学化工学院，福建省化学生物学重点实验室，厦门361005) fe耐tjn 摘要小批量制备了电泳纯鲨鱼肝铁蛋白(“ver of却缸m吐硼伽耽，SzLF)，对SzLF的结构与功能进 行了研究．在pH=2．0一10．O条件下，选用圆二色性(Circulardichroism，CD)光谱技术研究了SzLF和脱铁 核szLF(印oSzLF)二级结构转换的基本特征和变化趋势，揭示了szLF蛋白壳的亚基稳定性、相互作用强度 和去折叠现象．利用酸碱中和方法，解离szLF蛋白壳亚基，并再次构建成完整szLF．用紫外一可见分光光度 法和荧光光度法研究了构建纳米吡哕红c核．铁蛋白的途径．定量分析结果表明，每分子aposzLF可捕获12 分子吡哕红G于蛋白壳内，构建纳米吡哕红c核一铁蛋白．分析raposZLF直接捕获和释放吡l罗红G的途径 与速率，为后续构建高存量纳米顺铂核一铁蛋白药物载体提供了可行性技术． 关键词铁蛋白；结构转换；纳米吡哕红G核-铁蛋白；光谱分析 中图分类号0657 文献标识码A 文章编号0251聊90(20lOJ05旬896JD9 在自然界中，多数动植物及微生物细胞中均存在着一种高效和高存量储存无机铁磷的蛋白质…． 铁蛋白分子结构主要由蛋白壳、铁核和横跨蛋白壳的物质隧道组成一’3J，其中蛋白壳由24个同一类型 或不同类型(H和L)的亚基组成一’5j，铁核由数千个无机铁氧化合物和数百无机磷酸盐组成‘1’引．与细 胞色素c类似，铁蛋白亚基由4a螺旋柬结构构成，在金属电极或修饰电极t均表现出非电惰性特点， 即可以从金属电极中接受还原电子，并转化成化学能，供自身铁核进行氧化还原反应旧’¨，这一特点与 铁蛋白特殊亚基结构和高对称性亚基排布组合有关，但采用铁蛋白电极直接测定生物大分子的氧化还 原电位，或把电能转换为化学能供细胞或组织使用，还需进一步提高铁蛋白从电极上接收和传递电子 的速率． 铁核置换与亚基霞组研究指出，铁蛋白铁核可被置换成锰核、铜核、银／金核、钢核或铀核，并用 于开展治疗肿瘤疾病一’9。或研制高容量磁盘．铁蛋白反应器町直接捕获流动水体中的中性红、劳氏紫 及各种有机磷农药等有机小分子，用于连续监测和评估环境污染程度．据推测，在这一捕获过程中， 铁蛋白亚基之间出现瞬间错位，达到了拓宽隧道通道效果，有利于直接捕获有机小分子口1．选用酸碱 中和技术可直接使铁蛋白壳亚基解离与重组，并用于在蛋白壳内捕获抗肿瘤药物14羟正定霉素 核和蛋白壳亚基解离和重组的全过程，成功地构建了纳米胰岛素核一铁蛋白¨1|，但有关铁蛋白亚基解 离与重组技术捕获有机小分子或多肽的途径与机理，尤其是亚基解离和霞组过程中的a螺旋折叠、去 折叠和二级结构转换等问题，至今尚不清楚． elec咖n 选用透射电子显微镜(Tmnsmission microsc叩y，1’EM)技术可直接观测到不同酸度条件下 ferritinof 铁蛋白的蛋白壳和铁核的分子尺寸变化的趋势与规律，从而揭示了缸鱼肝铁蛋白(“Ver 如倒蠡如咖i，DALF．)和猪胰铁蛋白(Pigp肌creatic 收稿日期：2009研．22． 基金项目：国家自然科学基金(批准号和国家“九七三”计划项目(批准号：20lOcBl2640)资助