色色二肽与二价金属离子相互作用的初步研讨.pdfVIP

色色二肽与二价金属离子相互作用的初步研究 卢奎术刘仕强马丽 (河南工业大学化学化工学院郑州450052) 摘要： 移。 关键词： 色氨酸二肽二价金属离子 相互作用 在己发现的蛋白质中，有三分之一以上以金属离子或金属结合部位作为辅因子。金属蛋白和金 属酶的生物功能包括：结构支持、双氧结合、存储和转运金属离子、电子转移、分子识别和催化、 信号转导、基因表达调控【l】。这些蛋白质、酶或多肽与金属离子结合后才能发挥其本身的生物功能， 一旦金属离子缺失后，有的蛋白质的生物活性会降低甚至完全丧失。近年来的研究发现，许多神经 要的辅助因子，与蛋白质一起在执行各种生物功能时起着活性中心或结构中心的作用。因此，金属 离子与蛋白质之间的相互作用及作用规律，成为当今研究的热点之一。崔勐等【n1曾利用电喷雾串联 质谱技术研究了7种二肽与金属离子的相互作用。本文应用本实验室建立的多肽合成及纯化方法制备 得到色氨酸二肽【3{】，为了阐明多肽与金属离子相互作用的规律，本文利用紫外光谱法对色氨酸二肽 与二价金属离子(Cu2+、Ca2+、Zn’2+)的相互作用。 实验部分 1．1仪器和试剂 剂均为分析纯。 1．2色氨酸二肽tj9$1J备 减压浓缩至约15mL，待分离。 1．3薄层层析分离制备色氨酸二肽 硅胶板上样后用氯仿、甲醇和水混合溶液(氯仿：甲醇：水，65：25：4，V：VZV)展开，凉干后刮下呈粉 色的谱带，DHz．适量水，滤除硅胶，滤液减压蒸除水，干燥得白色固体色氨酸二肽。 1．4色氨酸二肽与金属离子混合液紫外光谱测定 光度仪扫描检测，空白以等摩尔溶度的金属离子溶液对照，检测范围200～400nm。 485 结果与讨论 2．1色氨酸二肽与Cu2+相互作用紫外光谱研究 色氨酸二肽与Cu2+相互作用紫外光谱变化如图2．1和表2．1所示。 AbS 覆：iji{≥享iiii…iiiii…iiiii≯I．．．…．．．．．jjjii 渡长(nm) 图2-1不同摩尔比下色氨酸二肽和硫酸铜水溶液的紫外光谱曲线 的混合溶液，以下类同。 表2—1不同摩尔比下色氨酸二肽和硫酸铜水溶液的紫外光谱数据 Cu2+后，280nm处的吸收峰无明显变化，而218nm处的吸光度却有明显变化。 同时最大吸收波长发生红移，这表明色氨酸二肽与Cu2+之间存在配位作用，参与配位的是羰基氧原 子，作用后的羰氧双键上的电子云密度降低，导致最大吸收波长变长。 2．2色氨酸二肽与Ca2+年gzn2+相互作用的紫外光谱研究 色氨酸二肽与Ca2+和Zn2+相互作用的紫外光谱变化分别如图2．2和图2．3所示。 Abs ／二肽{ 列…≯…-一-}………一 ≮≤声萨—b。|j 扳长【rim) 图2—2不同摩尔比下色氨酸二肽和氯化钙水溶液的紫外光谱曲线 486 Abs 0．‘1000 0．3750 0．2500 0．1250 0．0000 200．0 250．0 300．0 350．0 400．0 波长(rim) 图2-3不同摩尔比下色氨酸二肽和硫酸锌水溶液的紫外光谱曲线 色