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亚洲猪病学会第三届学术会议论文集(中文版) 猪瘟疫苗免疫的研究：成功免疫的关键因素 s∞ipa sumdll鸲D．VM．，Ph．D DepamllemofveterinaryMicrobiology’Faculty(系)ofveteri朋ryscience，Chulalongkomunivcrs毋 BaIlgkok(曼谷)10330，Thailand E一眦il：勘n咖乱s@曲“肠．卯．曲 摘要：猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种重要病毒病。它给包括亚洲各国在内的全球养猪业带来了严 重的经济损失。本文讨论了疫区疫苗免疫保护机制和成功免疫所需的关键因素。在泰国开展的一系列试验 表明，细胞免疫在抵抗猪瘟病毒感染中扮演着重要角色，而且猪瘟弱毒苗可以诱导完全的保护。然而，其 中有几个因素，包括母源抗体、首免日龄、免疫方案、其他病原引起的并发症。特别是猪繁殖与呼吸综合 症病毒感染，能够显著影响猪瘟疫苗的田间试验效果。研究结果凸现了抗体监测和其他用于检测猪群免疫状 态、配套免疫方案的诊断方法的重要性。 关键词：猪瘟；免疫；细胞免疫；猪繁殖与呼吸综合症病毒 前言 猪瘟(cSF)，又称猪霍乱，是猪的一种主要病毒病．给世界养猪业造成了严重的经济损失…。该病由瘟 病毒属的猪瘟病毒引起。猪瘟病毒(CSFv)是一种带有囊膜的单殷正链RNA病毒…。猪瘟病毒分三个基 因型【zJ。所有的基因型均已在泰国分离到，其中以1型和3型居多[3l。但是，在过去的十年中，由温和型 的2．2型猪瘟病毒引起的亚急性、慢性猪瘟病例不断增多。2，2型猪瘟病毒与欧洲猪瘟病毒亲缘关系很近， 于1996年在泰国首次分离到。从那以后，这种基因型的病毒在90年代的分离率超过50％【4】，成为疫区的 优势毒株。该毒株引起的临床症状较温和，从慢性型到亚急性型不等【4．5】。 在猪瘟高发区，常规猪瘟疫苗是预防和控制猪瘟的最常用的方法。但是，由于泰国的亚急性型猪瘟病 例的发生率在90年代呈上升趋势，人们开始怀疑猪瘟疫苗和免疫方案的有效性。自2000年起，本研究组 通过几项攻毒试验对现有商品疫苗的效果做了评价，并估计了免疫成功所需的关键因素。本文将对猪瘟的 疫苗免疫所诱导的保护机制作进一步的讨论。 疫苗诱导的免疫保护机制 为研究抗猪瘟病毒感染的免疫机制，我们使用了中国的猪瘟兔化弱毒苗(C株)。该疫苗是公认的、 适用于所有日龄的、能提供完全保护的疫苗。猪瘟兔化弱毒苗在首免2．3周后就可以诱导体内产生中和抗 体16JJ。但是，该疫苗似乎在免疫一周后就可以产生抗野毒感染的保护力口】。应当指出的是，有些情况下， 没有中和抗体存在也可以抗感染。这暗示细胞免疫在早期抗感染中起到重要作用。 细胞免疫能在免疫和免疫调节中发挥作用，并且在抗胞内病原(包括病毒)感染中很重要【l”。由于 缺乏检测细胞免疫的试剂和检测方法，先前的研究认为细胞免疫在免疫诱导中的作用有限。然而，在有抗 感染能力的猪的外周血淋巴细胞中发现存在抗原特异性淋巴细胞l】“。在免疫猪的外周血单核细胞(PBMc) 中也证实存在猪瘟病毒特异性的细胞毒性淋巴细胞【I’”j。试验中采用了一种检测与细胞免疫相关的细胞因 子的方法，用来评价细胞免疫。在这些细胞因子中，丫干扰素在诱导细胞免疫中的作用晟清楚。忏扰素在 抗病毒中有几项免疫调节作用，包括活化细胞毒性淋巴细胞、自然杀伤细胞、吞噬细胞等…J．测病毒特异 性丫干扰素水平是反映病毒特异性淋巴细胞活性的最直接的方法【l“”J。而且，病毒特异性T干扰素在很长时 间内都可以检测到，但淋巴细胞的增殖会因T细胞分泌自介素水平的下降而减少[1“。此前，用于计算分泌 伪狂犬病毒特异性T干扰素细胞数目的酶联斑点试验(PELIsPOTassay)已经建立成功。几份报告显示分泌 病毒特异性忏扰素细胞的数目是抗病毒免疫的最好指标II“”。为检测猪瘟病毒特异性忏扰素，几个研究 小组建立了评价猪瘟病毒特异性细胞免疫的酶联斑点试验【l4，”驯。我们的试验结果表明，用猪瘟兔化弱毒 苗免疫后的第六天即可在外周血单核细胞中检测到分泌猪瘟病毒特异性Y干扰素的细胞，一直持续到第140 天””。而且，在中和抗体还不能检测到的时候，携有大量分泌病毒特异性忏扰素的细胞的猪就具各抵抗 亚洲猪病学会第三届学术会议论