UV照射对棉铃虫产卵量及HMG—CoA还原酶和卵黄原蛋白基因表达量的影响.pdf

第 33卷 第2期 华 中 农 业 大 学 学 报 V01．33 No．2 2014年 3月 JournalofHuazhongAgriculturalUniversity Mar．2014，46～ 5O UV照射对棉铃虫产卵量及 HMG—CoA还原酶 和卵黄原蛋白基因表达量的影响 王智健 牛长缨 华中农业大学植物科学技术学院，武汉430070 摘要 检测紫外光(ultraviolet，uV)照射后棉铃虫 HMC-CoA还原酶基因、卵黄原蛋白基因的表达量及棉 铃虫产卵量的变化。提取经UV照射后棉铃虫雌虫的总RNA并反转录为cDNA。利用荧光定量PCR(qPCR) 技术检测HMG-CoA还原酶基因及卵黄原蛋白基因的表达量。UV照射后，统计棉铃虫雌虫的产卵量。结果表 明：UV照射 0．5～5．0h，棉铃虫 HM CoA还原酶基因的表达量显著增加；UV照射 1．O～5．0h，24h后取样 发现棉铃虫卵黄原蛋白基因的表达量显著增加 ；UV照射 1．O～4．0h，棉铃虫雌虫的产卵量显著增加。研究结 果证实UV照射能影响棉铃虫hmgr、vg的表达量和雌虫的产卵量。 关键词 棉铃虫；UV照射；HM CoA还原酶；卯黄原蛋白；产卵量 中图分类号 Q965；S435．622。。．9 文献标识码 A 文章编号 1000—2421(2014)02—0046—05 棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)寄主广泛、繁 转移lg；用 HMGR抑制剂处理德国小蠊 (Blattella 殖迅速、适应力强，对棉花生产造成严重危害，是世 germanica)、东亚飞蝗(Locustamigratoria)后，昆 界性农业害虫，近年来其发生和危害呈上升趋势。虫体 内保幼激素和卵黄原蛋 白的生物合成受到抑 利用黑光灯防治棉铃虫应用较广泛，对其趋光反应 制[。 u；RT-PCR表明小地老虎(Agrotisypsilon) 的研究主要集中于趋光的行为特点I1]、复眼对光的 HMGR主要存在于卵巢、脂肪体及咽侧体细胞 适应变化_2]、复眼形态及细微结构和复眼视网膜 的 中_1。此外，HMGR抑制剂一康帕丁(compactin)抑 电生理[3]。这些研究结果从行为特征和视觉生理方 制家蚕(Bombyxmori)和斜纹夜蛾(Prodenialitu— 面均证明棉铃虫对紫外光(ultraviolet，UV)非常敏 ra)性信 息素 的合成口引。 目前，HMGR基 因 感，但其分子调控机制尚不清楚。 (hmgr)已在果蝇[M]、德国小蠊[]、家蚕[¨]、小地老 研究表明，经UV照射后棉铃虫3一羟一3一甲基戊 虎 1『]和棉铃虫_】]等昆虫体内克隆得到。 二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶，HMGR)基 hmgr表达量与卵黄原蛋 白(vitellogenin，VG) 因表达量上调[。HMGR在类异戊二烯的生物合 的生物合成相关[1。VG是产卵雌性动物特定糖蛋 成中发挥着关键作用，是昆虫体 内甲羟戊酸代谢途 白卵黄前体，特异地存在于非哺乳类性成熟的卵生 径的限速酶l5]。甲羟戊酸代谢途径的终产物是保幼 雌性动物血液 中，是几乎所有卵生动物卵黄蛋 白的 激素、辅酶 Q和多萜醇，在昆虫的发育和繁殖过程 前体。VG为卵巢的发育提供营养，促进卵母细胞 中发挥着重要的作用，如调控胚胎发育、抑制昆虫变 的生长和分化。在昆虫体内，保幼激素激活脂肪体 态及诱导卵黄蛋 白原的合成_6]。有研究发现，昆虫 中卵黄原蛋白的合成，并促使卵母细胞成熟_g]。笔 体内HMGR受到抑制后，其体内保幼激素的生物 者以棉铃虫为材料，观察UV照射后棉铃虫产卵量 合成受到抑制，且导致单个卵巢里的卵量减少，雌虫 的变化及其对 HMG-CoA还原酶和卵黄原蛋 白基 的生殖力降低l_7]。HMGR在昆虫的生长发育、胚 因表达量的影响，旨在为深人研究HMG-CoA还原 胎发生和生殖中也发挥重要作用。HMGR能够引 酶基因对棉铃虫生殖能力的调控作用提供科学 导果蝇(Drosophilamelanogaster)原始生殖细胞的 依据 。 收稿 日期：2013—10—14 基金项 目：国家 自然