3第三章酶化学137030032.ppt

第五节 影响酶促反应速度的因素 非竞争性抑制： 非竞争性抑制：酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 加大[S]不能缓解抑制。 第五节 影响酶促反应速度的因素 非竞争性抑制特点： 第五节 影响酶促反应速度的因素 I和S在结构上一般无相似之处 非竞争性抑制剂作用不影响酶促反应的Km值，而使Vmax值变小。? 加大[S]不能缓解抑制。 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 底物与酶专一性结合 当[S]很低时，V随[S]呈直线上升，表现为一级反应。当[S]增加到足够大时， V几乎恒定，趋向于极限，表现为零级反应。 曲线表明，当[S]增加到一定数值后，酶作用出现了饱和状态，这可用中间产物学说加以说明。此时若要增加V ，则应增加酶浓度。 2、 [S]与V关系的解释： 当底物浓度较低时 反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。 [S] V Vmax ES量由底物决定 随着底物浓度的增高 反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。 [S] V Vmax ES量由底物和酶共同决定 当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应。要增加反应速度，必须增加酶浓度 [S] V Vmax ES量由酶决定 3、米氏方程： 1913年，Michaelis和Menten应用中间产物学说推导出[S]与V之间的数学表达式，称为米-曼方程（简称米氏方程） Vmax [S] V = ———— Km + [S] 其中：V—酶促反应速度；Vmax—酶完全被底物饱和时的最大反应速度；[S] —底物浓度；Km—米氏常数 4、米氏常数（Km）：当V=1/2 Vmax 时， Vmax Vmax [S] 1 [S] —— = ———— 即： — = ———— 2 Km + [S] 2 Km + [S] 2 [S] = Km + [S] 即： Km=[S] Km的涵义是：酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。 Km的单位为浓度单位，一般用mol /L 或 mmol /L表示 5、Km值的意义：酶学研究中一个极重要的数据 （1） Km值是酶的特征常数之一。不同酶有不同Km值，一个酶对一个底物有一定的Km值，当一个酶有多个底物时则每一个底物的Km值也不相同，其中Km值最小的底物为酶的最适底物 5、Km值的意义（1） Km值是酶的特征常数之一 （2）Km值可用于判断酶与底物亲和力的大小， Km愈大，说明酶与底物的亲和力弱， Km愈小，说明酶与底物的亲和力愈强。 5、Km值的意义 100%[S] 两边同乘 Km + [S]即： 90% = ———— 90%Km + 90%[S]=100%[S] Km + [S] [S] = 9 Km （3）用已知Km值带入米氏方程计算任意[S] 时的V，或任何V下的[S] 例如：当反应速度是最大反应速度90%时的底物浓度是多少？ 1、根据上表的数据，计算蔗糖酶反应速度（V）达最大反应速度（ Vmax ）60%时的棉子糖浓度。 2、根据上表的数据，当H2O2的浓度达到75 mmol /L 时，求其反应速度（V）达最大反应速度（ Vmax ）的百分比。 480mmol/L 75% Km值意义的总结： 1.Km的物理意义：酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度 2.Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。不同酶或同一种酶催化不同底物时Km值各不相同。 Km值意义的总结： 3.Km的大小近似地反映了酶与底物结合亲和力大小。Km越小，酶与底物亲和力越大。 4.如果一种酶可以催化几种底物发生反应，Km最小的底物是该酶的最适底物。 5.Km可以帮助推测某一代谢反应的方向和途径。 6. 可用已知Km值带入米氏方程计算任意底物浓度时的反应速度或任意反应速度下的底物浓度。 二、酶浓度影响 三、温度影响 四、pH影响 （直线关系） （单峰曲线） （单峰曲线） 二、E浓度影响 （直线关系） 当酶促反应体系的温度、pH不变，底物浓度足够大，足以使酶饱和，则反应速度与酶浓度成正比关系。 三、温度影响（单峰曲线） (1)、一方面是温度升高,酶促 反应速度加快。 (2)、另一方面,温度升高,酶的 高级结构将发生变化或变