支气管肺泡灌洗液检测腺苷脱氨酶诊断不典型肺结核临床分析.docVIP

精品论文 参考文献 支气管肺泡灌洗液检测腺苷脱氨酶诊断不典型肺结核临床分析 李钋1 邢岚 2 马慧1 侯秀峰1 陈晓艳1 王颖1 　　（1包头市第三医院 内蒙古包头 014040；2包头市蒙中医院 内蒙古包头 014040） 　　【关键词】电子支气管镜 肺泡灌洗液 腺苷脱氨酶 细胞免疫 结核分枝杆菌 不典型肺结核 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）35-0252-02 　　肺结核是呼吸系统常见疾病，目前肺结核的诊断金标准仍是痰菌阳性，而痰菌阴性的不典型肺结核的诊断常缺乏明确依据。我们采用检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的腺苷脱氨酶(ADA)含量，并与BALF结核菌涂片检查、实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测比较，以评价检测BALF中ADA在不典型肺结核诊断中的价值。 　　1 资料与方法　 　　1.1 资料 选取我院已经临床确诊的住院肺结核患者38例，依据结核中毒症状，细菌学或病理学检查，结合胸部X线、CT表现及(或)抗结核治疗，随诊2～4个月病灶逐渐吸收而确诊。另选35例本院住院的非结核肺部疾病患者作为对照，其中支气管炎6例，肺炎17例，支气管扩张症合并感染3例，肺部肿瘤9例，所有病例诊断均依据病史、痰细菌学检查、病理组织学检查、抗感染治疗2～3周后复查胸部X线检查示病灶完全或基本吸收确诊，肿瘤有病理诊断。 　　1.2 方法 所有病例结合肺CT按病变部位选择灌洗肺段，应用电子支气管镜常规检查,并按照中华医学会呼吸病学分会制定的肺泡灌洗液常规检查方法行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗术（PBAL），经负压吸引收集支气管肺泡灌洗液,并对所取标本做ADA含量检测、结核菌FQ-PCR检测、涂片查结核分支杆菌。 　　1.3 检测方法 支气管肺泡灌洗液分别做检测ADA含量、FQ-PCR检测、涂片抗酸染色镜检，ADA检测仪为日立7600，试剂由浙江东瓯生物技术有限公司生产，检测法为连续监测法；涂片抗酸染色镜检按照中国防痨协会结核病细菌学检测方法进行；FQ-PCR检测的结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒，由中山大学达安基因股份有限公司生产，FQ-PCR仪为美国MX3000P基因扩增仪，操作步骤严格按照说明进行；电子支气管镜采用OLYMPUS CV260型；消毒方法：全自动消毒清洗机清洗。 　　1.4 统计学方法 　　采用X2检验。P＜0.05具有统计学意义。 　　2 结果 　　结核组与非结核组BALF三种方法检测结果：肺结核组患者ADA浓度增高例数58%（22例），BALF结核菌涂片、FQ-PCR的阳性率则分别为2.6%（1例）、50%（19例）。本组病例ADA增高例数与FQ-PCR结果相近，与涂片法比较，x2检验示P＜0.05，差异有显著性。非肺结核组中BALF检测ADA增高者9例(26%)，FQ-PCR阳性2例(5.7%)，结核菌涂片为0。结核组BALF中ADA增高例数明显高于非结核组患者例数，且BALF中的ADA平均浓度结核组（47.6plusmn;13.5）明显高于非结核组（11.2plusmn;6.5），差异有统计学意义(Plt;0.05)。 　　3 讨论 　　肺结核是一种感染性疾病，病因明确，目前实验室诊断是确诊结核病的主要依据。腺苷脱氨酶(ADA)是嘌呤核苷代谢中最重要的酶类之一，是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶[1]，广泛分布于机体各种组织与细胞中，其在肺组织以及淋巴细胞中的含量最高[2]。其主要由活化或分化的T淋巴细胞产生，在单核细胞成熟过程中发挥作用[3]。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。涂片法简单、快速、经济，但灵敏性差，检出率低，且不能将结核杆菌与其他分枝杆菌区分开来。FQ-PCR是近年用于临床病原菌检测的一种具有高灵敏性、高准确性、高特异性、定量范围宽、操作简便、快速安全、污染最少的可靠的DNA体外扩增技术。我们采用连续监测法检测BALF中ADA含量，肺结核组增高者22例，占58%，FQ-PCR阳性率为50%，均显著高于BALF涂片结果（P＜0.05），非肺结核组BALF中ADA增高者9例，占26%，(其中9例肺部肿瘤患者于支气管镜活检病理明确诊断)，FQ-PCR阳性率只有5.7%。将肺结核组ADA与FQ-PCR的阳性结果结合，则阳性覆盖率为27例，占71%，明显高于这几种方法的单独阳性率。 　　肺结核是由结核分支杆菌引起的一种慢性传染病，其病理变化过程中有大量的T淋巴细胞浸润、活化，并伴有单核细胞的浸润、活化和转变成