构建RNA干扰载体特异性抑制绿色荧光蛋白表达的研究.pdfVIP

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第25卷第6期 南京医科大学学报(自然科学版) 2005年6月 ACTAUNIVERSITA7nSMEDICINAUS NANJING(NaturalScience) ·389· 构建RNA干扰载体特异性抑制绿色荧光蛋白表达的研究 张镁+,刘苏虎1,张王刚1 (西安交通大学第二医院病理科,1血液科,陕西西安710004) [摘 要] 定基础。 [关键词]RNA干扰;绿色荧光蛋白;多聚酶链反应 [中图分类号]R734 [文献标识码]A [文章编号]1007—4368(2005)06—0389—03 COnstructlOnOfasiRNA PCRmethOdthatreduceEGFP expressingpIasmidby expressiOn inCOS一7cellse仟icie ntly ZHANG Mei,LIUSu—hul,ZHANG Wang·gan91 (JDep硎靴mQ厂尸缸^oZ9趴仞印州撇m 7JDl,19‰I%inn) facilitatetheuseofRNAinterference in heremadeadetailed [Abstract]objective:‘ro lab6ratoryresearch,we technique oftheconstmctionofasiRNA PCR U6+27 cassetteandsiEGFP method.Methods:The description expressingplasmidby promoter wereobtajnedPCR weI-e 1 was jnto clonedinto 9.Theresuhant co—tmnsfected sequence by me£hod.They pUC plasmidpU6-siEGFP COS-7wit}l fluore售cent wasobservedundernuorescent pcDNA3.1/EGFP.Greenexpression micmscopy.Reslllts:Theplasmid can reducethe ofEGFPinCOS.7 constmctedthesiRNA pU6一siEGFPemciently expression cells.Concl吣ion:Wesuccessfullv PCRmethod.Theconstmctionis in facilitatesthewideruseof laboratories,which expressingplasmidby processapplicablemany RNAinterference technique. RNA chain words] nuorescent reaction [Key inted’erence;enhanced铲eenpmtein;polymemse

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