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第25卷第6期 南京医科大学学报(自然科学版)
2005年6月 ACTAUNIVERSITA7nSMEDICINAUS
NANJING(NaturalScience) ·389·
构建RNA干扰载体特异性抑制绿色荧光蛋白表达的研究
张镁+,刘苏虎1,张王刚1
(西安交通大学第二医院病理科,1血液科,陕西西安710004)
[摘 要]
定基础。
[关键词]RNA干扰;绿色荧光蛋白;多聚酶链反应
[中图分类号]R734 [文献标识码]A [文章编号]1007—4368(2005)06—0389—03
COnstructlOnOfasiRNA PCRmethOdthatreduceEGFP
expressingpIasmidby expressiOn
inCOS一7cellse仟icie
ntly
ZHANG
Mei,LIUSu—hul,ZHANG
Wang·gan91
(JDep硎靴mQ厂尸缸^oZ9趴仞印州撇m
7JDl,19‰I%inn)
facilitatetheuseofRNAinterference in heremadeadetailed
[Abstract]objective:‘ro lab6ratoryresearch,we
technique
oftheconstmctionofasiRNA PCR U6+27 cassetteandsiEGFP
method.Methods:The
description expressingplasmidby promoter
wereobtajnedPCR weI-e 1 was jnto
clonedinto 9.Theresuhant co—tmnsfected
sequence by me£hod.They pUC plasmidpU6-siEGFP
COS-7wit}l fluore售cent wasobservedundernuorescent
pcDNA3.1/EGFP.Greenexpression micmscopy.Reslllts:Theplasmid
can reducethe ofEGFPinCOS.7 constmctedthesiRNA
pU6一siEGFPemciently expression cells.Concl吣ion:Wesuccessfullv
PCRmethod.Theconstmctionis in facilitatesthewideruseof
laboratories,which
expressingplasmidby processapplicablemany
RNAinterference
technique.
RNA chain
words] nuorescent reaction
[Key inted’erence;enhanced铲eenpmtein;polymemse
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