酵母不对称还原4氯乙酰乙酸乙酯的研讨.pdfVIP

M008 母不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯的研究 晓霞 林建平 敬科举 刘樱 徐志南 岑沛霖 浙江大学生物工程研究所，浙江 杭州 310027） 要 从实验室保藏的七株酵母出发，筛选出具有较高产物得率和对映体过量的菌株——木兰假丝酵母。 研究了单相体系木兰假丝酵母还原4-氯乙酰乙酸乙酯时共底物种类及浓度、反应温度、pH 值和底物添加量 等因素对产物得率和立体选择性的影响。单相体系在高底物浓度时底物抑制严重，水/乙酸丁酯两相体系可 降低底物抑制的影响。 关键词 对称还原 4-氯乙酰乙酸乙酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 酵母细胞 对映体过量 ASYMMETRIC REDUCTION OF ETHYL 4-CHLORO- 3-OXOBUTANOATE BY YEAST LIN Jianping, JIANG Xiaoxia, XU Zhinan, JING Keju, LIU Ying and CEN Peilin Institute of B ioeng ineering ，Zheji ang University，Hangzhou 310027，Zhej iang，China ） Abstract: Among the seven yeast strains capable of reduction ethyl 4-chloro-3-oxobutanoate to ethyl (S)-4-chloro-3-hydrobutanoate we screened, Candida magnoliae the highest activity and stereo-selctivity, and was used for the subsequent study. The effects of the co-substrast their concentrations, temperature, pH, as well as the amount of sub strate concentration on the yield and enantiomeric excess (e.e.) of product in mono-phase system were examined in details.While the results show that the use of two-phase system can alleviate the inhibition of both substrate and product.. Keywords: asymmetric reduction, ethyl 4-chloro-3-oxobutanoate, ethyl (S)-4-chloro-3-hydro butanoate 引 言 手性药物是目前药学界最为关注的话题之一。含手性中心的化合物有多种对映体，它们在 [1] 人体内的药理活性、代谢过程及毒性存在显著差异 。具有光学活性的 -羟基酯类手性醇化合物 [2] 是一类重要的手性药物中间体 。S-CHBE ethyl (S)-4-chloro-3-hydrobutanoate，(S)-4-氯-3-羟基 [3] 丁酸乙酯）可用于合成HGM-CoA还原酶抑制剂 和-1，4 －二氢吡啶类钙离子通道阻断剂等药 [4] 物 ，具有重要的应用价值。目前，生产手性醇的主要方法有化学法和生物法两种。生物法在 制备高对映体过量的手性化合物方面具有效率高、成本低、装置简单、对环境污染小等优势。 利用酶的立体选择性能够合成一些化学方法难以合成的手性中间体。但在生物法中，辅酶和酶 的价格昂贵，提纯工艺复杂。直 利用微生物活细胞作为生物催化剂与以单一酶作为催化剂相 比有很大的优越性：一方面，微生物细胞具有完整的辅酶再生系统，可以在添加共底物情况下 方便地实现辅酶再生；另一方面，直 利用微生物全细胞 需要分离纯化酶，大大地节约了成 本。本文从实验室保藏的七株酵母菌株出发，筛