凤仙花花芽总RNA不同提取方法的比较.pdf

第4l卷 第 2期 河 南 科 技 学 院 学 报 2013年 4月 V01．41 No．2 JournalofHenanInstituteofScienceandTechnology Apr．2013 doi：10．39690．issn．1008-7516．2013．02．005 凤仙花花芽总RNA不同提取方法的比较 董娜，刘荷芬，周修任 (河南科技学院，河南 新乡453003) ． 摘要：为了得到高质量的凤仙花花芽的总RNA，以栽培凤仙花Impatiensbalsamina的花芽为材料，比较了Trizol 法、改良Trizol法、天根植物总 RNA提取试剂盒以及改 良CTAB法的提取效果．结果表明：Trizol法、改良Trizol 法、天根植物总RNA提取试剂盒均不能有效提取到凤仙花花芽总RNA；而改良CTAB法能够提取得到高质量 的总RNA，说明该法能有效去除多糖、多酚，适合凤仙花花芽总RNA的提取，并且得到的RNA质量高、完整性好， 完全可以用于后续的分子生物学实验． 关键词 ：凤仙花；花蕾；总RNA；提取方法 中图分类号：Q503 文献标志码：A 文章编号：1008—7516(2013)02-0020-04 ComparationofdifferentmethodsforRNA extractionfrom budof Impatiensbalsamina DongNa。LiuHefen．ZhouXiuren (HenanInstituteofScienceandTechnology，Xinxinag453003，China) Abstract：Inordertogethigh-qualitytotalRNAfrom cultivatedImpatiensbalsaminabud，fiveextractionmethods， Trizol，modifiedTrizol11and2,RNApreppureHantKitofTIANGEN andmodifiedCTABwerecompared．Trizoland modifiedTrizolIand2aswellasRNApreppurePlantKitofTIANGEN were determinedtohardlyextractRNA． ModifiedCTABwascapableofefficientlyremovingpolysaccharidesandpolypheno1．Thelightnessof28SrRNAofthe RNA isolatedbymodifiedCTABWSSsignificanthtan thatof18SrRNA．Th isindicatedthattheRNA extractedby modifiedCTABwasofhigh—qualityandgood—integrity，htusitwascompletelysuitableforfurthermolecularbiological research． Keywords：Impateins ba／samina；bud；toatlRNA；extractionmethod RNA提取是分子生物学研究的基础．在进行Northern杂交分析、基因体外翻译、cDNA文库构建、 cDNA末端快速扩增 (RACE)和差异显示反转录PCR(DDRT—PCR)等研究中均需要高质量的RNA．然 而，由于RNA不稳定、易降解，一旦提取的RNA质量不好，在反转录时往往无法合成