响应面法优化玉米黄色素的提取 (1).pdfVIP

第 29卷第 3期 滨州学院学报 2013年 6月 Vo1．29，No．3 JournalofBinzhouUniversity Jun．，2013 响应面法优化玉米黄色素的提取 张梅秀 ，郑明洋。，王元秀 (1．滨州学院，山东 滨州 256603； 2．济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院，山东 济南 250022) 摘 要 ：以吸光度为指标 ，通过改变正丙醇和 乙醇的配 比、温度 、底物浓度和提取 时间，进行 提取玉米黄色素的单因素实验 ，利用响应面法确定最优提取条件为提取温度 51．44℃、底物浓度 83．8g／L、正丙醇含量 19．47 、提取时间 1．5h． 关键词：玉米黄色素 ；正丙醇；乙醇 ；单因素；响应面法 中图分类号：Q 819 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—2618(2013)03—0109—05 玉米黄色素属于类胡萝 卜素，以卢一胡萝 卜素、玉米黄素(3，3’_二羟基一 胡萝 卜素)、隐黄素(3一羟基一 口胡萝 卜素)、叶黄素为主要组成的类胡萝 卜素的混合物[1]．玉米黄粉是湿法生产玉米淀粉过程 中的一种 副产物 ，含有蛋 白质 60 --70 ，含有玉米黄色素 0．2O～O．37mg／g，现在玉米黄粉主要用于饲料 ，从玉米 黄粉中提取玉米黄色素能够提高其利用价值[2]．研究表 明，多摄入玉米黄色素可增强免疫[3]，可降低患癌 症[4]、心血管疾病[5]、眼部疾病[6和白内障等风险．玉米黄粉 中提取玉米黄色素方法主要有混合有机溶剂 萃取、超临界CO 萃取、超声波有机溶剂提取法、酶法有机溶剂提取法L7叩等． 本实验以蛋白酶及超声波对玉米黄粉进行预处理后 ，再 以混合有机溶剂混合对玉米黄色素进行提取 ， 通过单因素实验和响应面法得到最佳提取条件． 1 材料与方法 1．1 试剂与材料 碱性蛋 白酶 Protex6L、中性蛋白酶 Protex7L，系美 国Geneneeor公司产品．无水乙醇 、正丙醇 、正丁 醇、三氯甲烷、正 己烷 、石油醚、丙酮 (分析纯)；卢一胡萝 卜素标准样品(美 国sigma公司)，其他试剂均为国 产分析纯．玉米黄粉 ，山东鲁洲集团提供． 1．2 仪器设备 UV一260型紫外可见分光光度计 (日本岛津仪器有限公司)；PHS一3B精密 pH 计 (上海雷磁仪器 厂)；DK一8D型电热恒温水槽 (上海精宏实验设备有限公司)；增力 电动搅拌机 (上海标本模型厂)；电子天 平 (上海光正医疗仪器有限公司)；723型可见光分光光度计 (上海精密仪器仪表有限公司)，Xo一400SD型 超声波细胞破碎仪 (南京先欧仪器制造有限公司)；RE一52A 型旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂)； TGL16M 型离心机 (长沙湘智离心机仪器有限公司)． 1．3 实验方法 玉米黄粉酶解预处理 ：取玉米黄粉加入到NaHCO。一NazCO。(plil1．0)缓冲液中，底物浓度 120g／L， 收稿 日期 ：2013—04一O1 基金项 目：济南市科技发展计划项 目(TNK0908) 第一作者简介 ：张梅秀(1982一)，女，广东南雄人 ，硕士，从事生物活性物质制备研究，E-mail：zmx190895702@163．corn． 11O 滨州学院学报 第 29卷 按 48000U／g加入碱性蛋白酶和中性蛋 白酶使其酶活比例为 5：1，保持初始 pH不变 ，55℃恒温水解 2hll，离心 5000r／min，10min后取沉淀 ，80℃烘干 5h，用于玉米黄色素的提取． 提取溶剂的选择 ：称取 2g预处理后的玉米黄粉分别加入 2OmL无水 乙醇、正丙醇、丙酮 、正丁醇、三 氯甲烷 、正己烷、石油醚中，超声波功率为600W，频率为高频处理 10次后_1，静止提取 2h，吸取澄清的有 机溶剂提取液通过 UV一260型紫外分光光度计进行波长扫描测得最佳吸收波长．测定最佳波长下各有机 相吸光度 ，以确定最佳吸收溶剂． 提取条件单 因素实验 ：称取预处理后 的玉米黄