响应面法优化脂肪酶活性包涵体固定化条件.pdfVIP

食品与药品 FoodandDrug 2012年第 14卷第01期 论 著 · 响应面法优化脂肪酶活性包涵体固定化条件 林 康 ，陈欣宁，李素霞 ，许建和 ，潘 江 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237) 摘 要：目的 优化SerratiamarcescensECU101O脂肪酶活性包涵体的固定化条件。方法 利用Plackett—Burman试验设计筛选 影响固定化过程的几项因素，用最陡爬坡实验逼近最大响应区域，采用Box—Behnken试验设计NtDesign—Expe~软件对实验 结果进行二次回归分析。结果 戊二醛 (GA)浓度，酶浓度 ，GA与酶用量比对固定化过程的影响较显著。通过求解回归 方程得到最佳固定化条件：GA浓度0．13％ (w／v)，酶浓度16．5mg／mL，GA与酶用量 比l1：2。结论 在优化条件下，固定 化酶的酶活性可达426．6UL／，预测值与验证实验平均值基本相符。 关键词：脂肪酶活性包涵体；固定化；Plackett．Burman设计法；响应面法；优化 中图分类号：Q814．2 文献标识码：A 文章编号：1672．979X (2012)01．0001．05 OptimizationofImmobilizationConditionsofLipaseActiveInclusionBodybyResponse SurfaceM ethodology LIN Kang，CHEN Xin—ning，LISu-xia，XU Jian—he，PAN Jiang (StateKeyLaboratoryofBioreactorEn#neering,EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237， China) Abstract：ObjectiveTooptimizetheimmobilizationconditionsoflipaseactiveinclusionbody．MethodsFirstly, theimportantfactorsinfluencingtheprocessofimmobilizationwereevaluatedbyinitialscreeningmethodof Plackett—Burman．Then，thepathofsteepestascentwasundertakentoapproachhteoptimalregionofhtesignificant factors．Finally，Box—BehnkendesignandresponsesurfaceanalysisbyDesign—Expert softwarewereadoptedto furtherinvestigatethemutualinteractionsbetweenthevariablesandtheoptimalvalues．ResultsTheconcentrations ofglutaraldehyde (GA)andenzymeaswellastheratioofGA toenzymehadsubstantialinfluenceonlipase immobilization．Theoptimalimmobilizationconditionswereasfollows：GA 0．13％ (w／v)，enzyme16．5mg／mL， ratioofGA toenzymeof11：2．ConclusionUndertheoptimalconditions，theactivityofimmobilizedlipasecanbeup to426．6U／L，whichisonthewholeconsistentwiththepredictivevalue． KeyW ords：lipaseactiveinclusionbody；immobilization；Plackett—Burmandesign；responsesurfacemethodology； optimization 脂肪酶 (EC3．1．1．3)是一种重要的工业用甘油 酶活性，能够有效地抵御