固定化对红豆杉细胞膜ATPase+活性及相关离子浓度和紫杉醇合成的动态影响研究.pdfVIP

M044 固定化对红豆杉细胞膜ATPase 活性及相关离子浓度 和紫杉醇合成的动态影响 尹德明，葛志强，元英进* （天津大学化工学院制药工程系,300072,天津） 摘 要 对固定化微环境下东北红豆杉 （Taxus cusp idata ）细胞膜ATPase 活性及相关离子浓度和 紫杉醇合成的动态变化进行了研究。结果表明：在培养的前20 天，固定化能促进细胞的生长， 与对照组相比，生物量差异显著。但从 20 天后固定化细胞生物量的增长明显低于悬浮培养细胞 的，特别是在第25 天和第30 天，固定化细胞与对照组细胞的生物量差异达极显著。固定化促进 了细胞膜 H+-ATPase 的活性，并在第 15 天达到高峰。此后酶活性下降趋于稳态，而悬浮细胞 + H -ATPase 的活性在前15 天没有明显变化，此后活性上升并在第30 天达到最高值。固定化细胞 的酶活性与对照组的从第25 天到第35 天差异显著。固定化在前20 天促进了Ca2+-ATPase 的活性, 此后酶的活性下降并趋于稳态。而悬浮细胞Ca2+-ATPase 的活性在第25 天达到最高峰，此后活性 也开始下降。固定化细胞和悬浮细胞的Ca2+-ATPase 的活性从第15 天到第35 天后差异性显著。 固定化微环境在前20 天呈酸性条件，有利于细胞的生长，从第25 天后微环境呈碱性化条件，不 利于细胞的生长，因此细胞的生长受到了限制。H+ 、Ca2+在泡沫内、外呈现明显的浓度梯度。固 定化细胞的紫杉醇含量在前20 天变化平缓。从第20 后天起含量开始大幅度上升，第35 天达到 最高值 18.11µg/g ，是悬浮细胞的4.06 倍，并且紫杉醇的产量高而稳定。与悬浮细胞相比，固定 化细胞的紫杉醇的产量差异达极显著。而悬浮细胞的紫杉醇含量没有明显变化。经分析得出紫杉 醇的含量和H+ -1.376 2 -ATPase 的活性之间的关系呈y= 108.36x (R =0.9511)幂函数关系。 关键词 固定化，聚氨酯泡沫，微环境，东北红豆杉，ATPase Dynamic Effects of Immobilization on Activities of Membrane ATPase,Concentration of Related-to-ion and Taxol Content of Taxus cuspidata Cells Yin De-ming,Ge Zhi-qiang,Yuan Ying-jin (Depar tment of Pharmaceutical Engineering,School of Chemical Engineering Technology,Tianjin University,300072,Tianji n) Abstract Dynamic effects of immobilization by polyurethane foam on membrane-ATPase + 2+ activities, related-to-ion H 、Ca concentration and taxol content of Taxus cusp idata were + 2+ investigated. The results showed that the H -ATPase and Ca -ATPase activities of immobilized-cell increased before 15 days and 20 days, respectively. Microenvironment was 基金项目:国家自然科学重点基础基金(No 作