非体外循环下重建肺动脉的动物模型及其应用研究.pdfVIP

、 武汉华中农业大学 2006．10 维细胞生长较快，消耗大量的养分，上皮细胞生长受到抑制。所以本实验采用胰酶消化法只离散表面的、E 皮细胞，再用刀片轻刮角膜上皮表面，结果几乎没有杂细胞污染。为保证胰酶只消化上皮，谢立信等嘲采 用琼脂板凹面对角膜细胞进行消化。我们所采用的凹面玻璃与之异曲同工，且便宜简单可以反复利用。而 对于角膜基质细胞，由于其占有角膜的绝大部分，上皮和内皮由于比较容易刮除干挣。基质细胞是成纤维 细胞易被胰酶消化过度，所以在本实验中采用组织块培养亦收到不错的效果，细胞生长干诤不见杂细胞污 染。角膜块在放入培养孔时，为防止其滑动或漂浮，应先在无培养基的条件下放置一段时间，待其稍干后 再加培养液。。培养液的量不宜过多，首次以覆盖培养孔为宜。培养液的量太多容易使组织块漂浮，细胞不 宜贴壁，量太少则容易使组织细胞干死。 角膜上皮细胞的培养条件要优于其他普通的上皮细胞。本研究采用DMEM／F-12培养基，该培养基是由 细胞培养。国外的角膜细胞培养中常常加入表皮生长因子、胰岛素、转铁蛋白等生长附加成分以获得良好 的细胞培养的体外模型H1。本研究将别人使用的15％胎牛血清的量加大到20％，省去使用表皮生长因子和转 铁蛋白等获得了还比较不错的效果。估计是胎牛血清中的胎牛球蛋白，多肽血小板促生长因子及促生长激 素等含量的增高发挥了较好的促细胞生长作用。 本研究通过参考兔、猫及人角膜上皮、基质细胞的培养扩增方法nJl．摸索并建立一种简单稳定易行的 犬角膜细胞的培养方法。通过对少量组织的培养获得扩增获取较大量的细胞，为组织工程化角膜体外扩建 提供种子细胞。同时培养出的细胞是否有较强的增生能力，尚待进一步的生物学鉴定和增殖能力的检测。 参考文献(略) 非体外循环下重建肺动脉的动物模型及其应用 陈恩‘。丁文祥。，苏肇伉2，蒋祖明‘。俞晓青‘，邹文艳1 (1上海市先天性心脏病研究所，上海200127；2上海交通大学医学院附属新华医院上海儿童医学中心胸心外科，上 海200127) 摘要为了证明非体外循环下重建肺动脉动物模型的可行性及用亲水性交联荆处理的牛颈静脉适用于 制备婴儿右心流出道修复材料．作者进行二方面的研究1)动物模型：在气管插管硫苯妥钠静脉麻醉，无 体外循环支持下用7条犬建立右室一肺动脉旁路；12条行肺动脉补片扩大手术，手术时用定制的动脉侧壁钳 部分钳闭右室流出道或肺动脉主干后切开右室壁或肺动脉，将亲水性交联剂处理的带瓣牛颈脉近远端分别 与前二切口吻合或用制备的管道剖成的带瓣补片扩大肺动脉主干．旁路手术后原肺动脉于以结扎，建模后 进物6个月的观察采样：2)修复材料制备：分别用4％的EX-313与0．5％的戊二醛处理牛颈静脉带瓣胶原管 道，所获的材料分别进行外观、瓣膜功能、扫描电镜与光镜检查，以及生物力学的测试并并用其在非体外 循环条件下重建犬肺动脉，并进行近远期血管组织重构的观察．所获的数据进行T-测验．证明非体外循环 下可以顺利重建犬类的右心旁路实验模型并可以中常期存活，完成采样观察；证明EX-313及内壁肝素化处 理后的材料比单纯戊二醛处理者质地更接近天然血管，结构同充满空隙，抗张强度与戊二醛处理者相当， 抗钙化与抗栓方面明显优于戊二醛处理者．植入血管组织重构良好内皮化完善．在非体外循环下建立重建 右心流出道的动物模型对心血管修复材料的研究具有实用、简便、经济的意义；经亲水性交联剂Ex一313处 理的牛颈静脉有可能成为较理想的婴儿用右心流出道修复材料． 关犍阀：动物模型；牛颈静脉；带瓣管道；抗钙化 先心病早期纠治已成为当前先心外科的的发展趋势，婴幼儿心血管修复材料的缺乏的矛盾日益突出， 而右心发育不良畸形在我国远较欧美国家为常见，因此开拓婴儿用右心流出道修复材料有十分重要的临床 意义。建立重建右心流出道及肺动脉通道的动物模型是研究修复材料必需的重要工具。Ⅲ用牛颈静脉作基 础材料经剥制，脱内皮，亲水性环氧化合物交联及内壁肝素化后制成带瓣管道并用杂种犬进行了肺动脉通 352 全国兽医外科学第13次学术研讨会小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会论文集 道重建的活体实验，提示了牛颈静脉经EX-313处理后制备的小口径带瓣管道有很好的临床应用前景，在非 体外循环下建立重建右心流出道的动物模型对心血