手性化合物的毛细管电泳分离新方法研究.pdfVIP

摘 要 论文摘要 近年来，手性对映体的拆分问题一直是分析化学研究的热点之一。毛细管电泳因 为具有高灵敏度、高选择性和高分辨率的特点，为手性分离提供了一条崭新的途径， 并已发展成为一个极其活跃的研究领域。建立简便、快捷、准确、灵敏的对映体的毛 细管电泳分离分析方法具有非常重要的学术意义和应用价值。我们围绕着构筑新的毛 细管手性拆分方法开展了这方面的研究。本论文共分为六章，分述如下: 第一章 本章着重介绍高效毛细管电泳法对映体的分离机理、各种模式以及最近十年来 的具体应用和最新进展，并阐述了本论文的目的和意义。 第二章 组合运用手性选择剂是提高手性分离选择性和分离度的一种有效的方法，以毛 细管电泳一二极管阵列检测为分析手段，研究了手性选择剂的添加组合，获得了一个具 有一定拆分性能的二元手性选择剂协同体系。本章以Mn+-L一丙氨酸(L-Ala)络合物和p- 环糊精.-CD)为二元手性选择剂，对丹酞化氨基酸对映体进行手性拆分，拆分能力 明显大于单独用其中的一种。实验考察了分离温度、缓冲溶液PH值、Mn2+-L-Ala络 合物及有机改性剂浓度、不同金属中心离子种类对手性拆分的影响;并就拆分机理进 行了初步探讨，这是目前Mn2+作为金属络合物配位体交换的中心离子应用手性拆分 的首例报道。 第三章 CU(II)一缴氨酸 (Valine,Val)是一种高效的手性选择剂，己有报道成功地将}Ilfj! 氨酸作为手性添加剂应用于HPLC的手性分析，并获得了很好的手性分离结果。以Val 为手性识别剂用毛细管电泳进行手性拆分未见报道。本章以Cu(II)-L-W I,酸络合物作 为毛细管电泳的手性流动相添加剂、以配位体交换一胶束电动色谱法同时拆分了两对非 衍生化氨基酸及十一对丹酞化氨基酸对映体。结果发现，SDS浓度对手性分离效率有 显著的影响，在20mmol/LSDS存在下，对映体均可达到或接近基线分离。此外，还考 察了其它实验条件如:缓冲液PH值、CU(II)与L-90氨酸的摩尔比、Cu(II)-L-M ,酸络合 物的总浓度对分离的影响，得到最佳拆分条件为:20mmol/LNH40Ac(PH9.0)+4 mmol/LCUS04+8mmo/lLL-Val+20mmol/LSDS。本章还比较了以其它氨基酸，即L- 丙氨酸 (Ala),L一谷氨酸 (Glu)、L-丝氨酸 (Ser)和L一鸟氨酸 (Orn)代替L-Val为手 性配体对手性氨基酸迁移时间和分离度的影响，并就可能的拆分机理尝试进行了探 手性化合物的毛细管电泳分离新方法研究 讨。本论文首次将撷氨酸作为流动相添加剂在毛细管电泳领域开展HPCE手性分析工 作，既降低了实验成本，又拓宽了撷氨酸在HPCE手性分析中的应用范围。 第四章 青霉胺 (Penicillamine,PEN)是一种含有琉基 (-SH)的氨基酸，对金属离子 有较强络合作用，并具有促进Igm还原分解作用，故广泛应用于治疗肝豆状核变性病 (Hepatolenticulardegeneration,HLD),类风湿关节炎。本章首次以PEN为手性配体、 CU(II)为中心金属离子，以配位体交换一胶束电动色谱法 (LE-MEKC)拆分了八对丹酞 化氨基酸对映体。三种结构相似的配体，即PEN.N一乙酞-PEN和Val的拆分性能的大 小依次为:PENValN一乙酞-PEN;这说明一SH未参与手性识别的过程。分别对 SDS浓度、pH值、Cu(II)-D-PEN络合物浓度等实验参数进行优化，得到最佳拆分条件 为:4mmo/lLCuSO4,8mmol/LD-PEN，20mmo/lLSDS,20mmol/LNH40Ac(pH 6.5)08对氨基酸对映体在最佳条件下均得到良好的分离，分离度在1.1-5.9之间。以 L-PEN代替D-PEN时，Dns-Phe对映体的迁移顺序发生了逆转，由LD变为D L;.以外消旋的PEN (L-PEN:D-PEN=I:1)为识别剂无法拆分对映体。 第五章 鸟氨酸是一种碱性氨基酸，其末端氨基会与毛细管内壁发生静电吸附作用，本 章建立了以L一鸟氨酸为配体、以cu(II)为中心金属离子，毛细管电泳手性拆分体系， 并将该体系成功应用于非衍生化和丹酸化氨基酸、二肤、麻黄碱与伪麻黄碱等多种手 性物质的拆分。为抑制鸟氨酸与毛细管内壁的吸附作用，本章制作了丙二胺涂层毛细 管，以这种涂层毛细管在相同的实验条件下获得分离的效率