MAEL基因在乳腺癌中的表达及相互作用蛋白的筛选研究.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 10542 学号 200814020040 MAEL基因在乳腺癌中的表达及相互作用蛋 白的筛选 r ofMAEL i nbreastcance ressi on gene Exp r i oftheProtei ns andSceen ng I nteracti wi thMAEL ng 指导教师姓名、职称周建挞塾援韭鳇麴援 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一一年五月 一苓一一，牛直月 lIIlillIlllllUl Ull111IllI Y1913039 摘 要 许多肿瘤激活了生殖细胞特异表达基因，这类在多种肿瘤组织中 高表达、但在正常组织中的表达仅限于睾丸的精细胞的基因被称为癌 一睾丸基因。癌一睾丸抗原被广泛用作肿瘤免疫治疗的靶标，也可作为 癌症诊断和预后的分子标志。 已有研究结果表明MAEL基因是一个睾丸生殖细胞特异表达基 因，在睾丸以外的其他正常人体组织中没有表达。本文通过RT—PCR 检测人类五个不同类型的癌细胞系中MAEL的mRNA表达，发现MAEL 程度的表达。MAEL在睾丸和癌细胞中特异表达说明了MAEL是一个癌 ／睾丸基因中的新成员。 为了探究MAEL基因转录调控的机制，本文克隆并分析了MAEL基 用DNA亚硫酸氢盐测序法测定了两种乳腺癌细胞中MAEL基因启动子 的1个GC盒和2个WTl结合位点中的胞嘧啶甲基化程度不同。用 显著提高，这些结果说明MAEL基因的转录受到其基本启动子的甲基 化的调控。 为了研究MAEL在癌症中的作用机制，本文通过免疫共沉淀结合 能与MAEL相互作用的蛋白质进行G0功能注释和聚类分析，结果表明： 从分子功能来看，这些与MAEL相互作用的蛋白多数是RNA结合蛋白和 DNA结合蛋白，从所处的细胞位置来看，这些蛋白多数以核糖核蛋白 的形式存在，位于胞质和线粒体中居多。参与的生物过程主要是RNA 加工和大分子复合物的组装。 本文首次发现睾丸特异表达基因MAEL在癌细胞中的表达，并研 究了MAEL基因的表达调控及筛选了与MAEL蛋白相互作用的蛋白，为进 一步了解癌症发生原因和MAEL基因功能奠定了基础。 关键词：MAEL，乳腺癌，癌一睾丸基因，DNA基化，蛋白质相互作用 Ⅱ ABSTRACT are activatedin germline“。specific Many genesaberrantly various thatare malignancies．Thegenes normallyexpressed in cellsofthe are onlygerm test