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园 艺 学 报 2014 ，41 （1）：1 –8 http：// www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail ：yuanyixuebao@126.com 异源韧皮部特异启动子在转基因枳中的表达 * 许兰珍，彭爱红，何永睿，姚利晓，雷天刚，刘小丰，姜国金，邹修平 ， * 陈善春 （西南大学柑橘研究所/ 中国农业科学院柑橘研究所，国家柑橘工程技术研究中心，国家柑橘品种改良中心，重庆 400712 ） 摘 要：为了筛选在柑橘韧皮部中特异表达的启动子，构建 GRP、Rolc 、RSSl 异源韧皮部特异启动 子控制 GUS 报告基因的植物表达载体，转化枳[Poncirus trifoliata （L. ）Raf.]上胚轴。GUS 组织化学染色 分析表明，3 个启动子均显示了维管束组织特异性。其中，GRP 启动子活性强，且具有严格的韧皮部组织 特异性；Rolc 启动子活性最强，在根和茎中呈组成型表达；RSSl 启动子活性最弱。Real-time RT-PCR 和 GUS 酶活性分析进一步证明了 GRP 启动子具有较强的韧皮部组织特异性，该启动子有望应用于柑橘抗黄 龙病基因工程育种。 关键词：枳；韧皮部特异性启动子；遗传转化；GUS 中图分类号：S 666 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）01-0001-08 Expression Analysis of Three Phloem-specific Promoters in Transgenic Poncirus trifoliata XU Lan-zhen ，PENG Ai-hong ，HE Yong-rui ，YAO Li-xiao ，LEI Tian-gang ，LIU Xiao-feng ，JIANG * * Guo-jin，ZOU Xiu-ping ，and CHEN Shan-chun （Citrus Research Institute，Southwest University ；Citrus Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences； National Citrus Engineering Research Center ；National Center for Citrus Varieties Improvement ，Chongqing 400712 ， China） Abstract ：For screening phloem-specific promoters in citrus，the plant expression vectors containing GUS reporter cassette driven by Glycine-rich protein gene promoter（GRP ）from Vigna unguiculata（Linn. ） Walp （bean ），Agrobacterium Rhizogenes RolC gene promoter （Rolc ）from Agrobacterium rhizogenes and Sucrose synthase 1 gene （RSSl ）promoter from Oryza sativa （rice ）were constructed ，and introduced into the Poncirus trifoliata （L. ）Raf. seedling epicotyls by Agrobacterium -mediated transformation. Histo