逆境诱导转录因子tDREB2A转化百合的研究.pdfVIP

园 艺 学 报 2014 ，41 （1）：149 –156 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 逆境诱导转录因子AtDREB2A 转化百合的研究 1,* 1 1 2 尚爱芹 ，高永鹤 ，段龙飞 ，杨利平 1 2 （河北农业大学园艺学院，河北保定 071001 ； 长江师范学院生命科学与技术学院，重庆 408100 ） 摘 要：以东方百合‘西伯利亚’为试验材料，探讨影响农杆菌转化效率的因素，优化了以无菌小 鳞片为外植体的遗传转化体系，通过农杆菌介导法将逆境诱导转录因子 AtDREB2A 基因转入百合基因组 中。结果表明：外植体预培养 3 d，侵染菌液浓度 OD600 = 0.8 ，侵染时间 20 min ，25 ℃下共培养 3 d，获 得的卡那霉素阳性植株率最高。对获得的 59 株抗性单株进行 PCR 检测，有 28 个单株的 DNA 经扩增后 产生了与阳性对照相同的特异扩增带。进一步对转基因阳性植株进行 Southern 杂交鉴定，结果表明外源 基因已经整合到转化植株的基因组中。生理指标测定表明转基因植株的对高温的适应性有一定程度的提 高。 关键词：百合；抗热性；转录因子；AtDREB2A ；遗传转化 中图分类号：S 682.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）01-0149-08 Studies on Transformation of Lily with Dehydration Responsive Element Binding Transcription Factor AtDREB2A 1,* 1 1 2 SHANG Ai-qin ，GAO Yong-he ，DUAN Long-fei ，and YANG Li-ping 1 2 （College of Horticulture，Agricultural University of Hebei ，Baoding ，Hebei 071001 ，China；College of Life Science and Technology，Yangtze Normal University，Chongqing 408100 ，China） Abstract ：In the study，by investigating the factors influencing the transformation efficiency of Lilium ‘Siberia’，a genetic transformation system of scales was optimized. By Agrobacterium -mediated，the AtDREB2A gene was transformed into ‘Siberia’. The results indicated that the highest rate of kanamycin- resistant plants was obtained through the following transformation procedure ：After preculture for 3 d ，the explants were infected for 20 min with diluted OD600 = 0.8 Agrobacterium