高效液相色谱法与荧光光度法检测中药材中的黄曲霉毒素的比较研讨.pdfVIP

高效液相色谱法与荧光光度法检测中药材中的黄曲霉毒素的比较研究 张雪辉 陈建民* 中国协和医科大学 中国医学科学院 药用植物研究所 北京 100094 摘要 目的 发展一种适合用来检测中药 中药材及中成药 中黄曲霉毒素B B G 和 1 2 1 G 含量的检测方法 免疫亲合柱净化-高效液相色谱柱后溴化衍生荧光法 在此基础上 2 同时比较研究免疫亲合柱 IAC 净化-HPLC 柱后溴化衍生荧光法检测黄曲霉毒素 B B 1 2 G 和G 含量的方法与溴化荧光光度法 SFB 法 检测黄曲霉毒素总量的方法的适用性 方 1 2 法 在免疫亲合柱净化-HPLC 柱后溴衍生荧光法中 药材经甲醇 水 70 30 溶剂系统 提取后 采用免疫亲合柱净化 富集黄曲霉毒素 用甲醇将免疫亲合柱上的黄曲霉毒素洗脱 下来 净化后的样品溶液通过高效液相色谱柱分离后 进入柱后衍生管中与过溴化溴化吡啶 溶液发生反应 最后进入荧光检测器分别检测黄曲霉毒素 B B G 和 G 含量 在 SFB 1 2 1 2 法中 样品经甲醇-水 70 30 提取后 再经免疫亲合柱净化 富集黄曲霉毒素 前处理 后的样品溶液中添加一定量一定浓度的溴水溶液后 迅速置于荧光光度计中读数 结果 免 疫亲合柱净化-HPLC 柱后溴衍生荧光法中 考察了党参 神曲和桃仁这3 种不同基质的药 材中添加2 个水平混标品的回收率实验 回收率平均值在93%-97%之间 RSD 值3- 12% 黄曲霉毒素 B 和 G 的最低检出限为 0.06ìg/kg 黄曲霉毒素 B 和 G 的最低检出限为 2 2 1 1 0.20ìg/kg 精密度实验的RSD 值在0.8%- 1.4%之间 运用此高效液相色谱方法检测了 39 种 中药中黄曲霉毒素B B G 和G 的含量 同时运用SFB 法检测了上述39 种中药中黄曲 1 2 1 2 霉毒素的总量 结论 采用免疫亲合柱净化 结合柱后溴衍生化的高效液相色谱-荧光检测 器检测几十种常用中药材及中成药中黄曲霉毒素B B G G 的含量 具有快速 简便 1 2 1 2 灵敏准确 自动化高等优点 完全能满足批量检测的需要 而 SFB 法不适合用来检测中药 中的黄曲霉毒素的总量 由于中药中存在许多与黄曲霉毒素结构相似的化学成分 样品经免 疫亲合柱净化后 仍有许多干扰性成分存在于供试品中 因此 采用 SFB 法检测中药中的 黄曲霉毒素总量容易给出假阳性结果 关键词 黄曲霉毒素 免疫亲合柱 中药 高效液相色谱 荧光光度法 检测方法 Comparative study of post-Column derivatization with bromine by HPLC and fluorometric analysis for determination of aflatoxins in medicinal herbs and plant extracts ZHANG Xue-hui CHEN Jian-min* (Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peki