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第三章 细胞分离技术 第一节、细胞分离 第二节、细胞破碎 第三节、胞内产物的溶解及复性 部分微生物胞内酶 胞内重组药物 分离胞内产物与胞外产物的差别是什么？ 为回收和提纯胞内产品, 必须先将它们从胞内释放到胞外, 然后进行分离纯化。 可以采用分泌性宿主使胞内产物直接分泌到胞外; 也可用破碎细胞的方法使其释放出来。 细胞与液体物质的分离又称为固液分离，固液分离方法包括过滤与离心沉降。 二、离心沉降 沉降法：指固体颗粒在外力作用下与液体物质做相对运动最终实现固液分离的技术。 沉降法根据作用外力的不同，可分为重力沉降和离心沉降。 离心沉降是利用惯性离心力和物质的沉降系数或浮力密度的不同而进行的一项分离、浓缩或提取条件。 1) 差速离心法 离心分离法根据其操作方式的不同，又可分为差速离心和密度梯度离心。 离心过滤机可分离固体密度大于或小于液体密度的悬浮液。 可分为: 连续式离心机和间歇式离心机。 第二节 细胞破碎 细胞破碎： 指选用物理，化学，酶或机械的方法来破坏细胞壁或细胞膜。 一、细胞壁结构 细胞壁化学组成非常复杂, 取决于 微生物类型 细胞的年龄 细胞的生长生理学 多糖，脂质，蛋白质在三维结构上的排列方式 细胞壁的结构 二、细胞破碎率 破碎率： 被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分数。 1）直接记数法 2）间接记数法 1）直接记数法 平板计数技术 需时