IBV分子进展.pptxVIP

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的分子生物学研究进展IB简介鸡传染性支气管炎（Avian Infectious Bronchitis ，IB）是鸡的一种急性、高度接触性传染病，本病的易感动物主要是鸡，亦见于鸽等动物，鸡6周龄以内发病率高达90％，死亡率在25％～40％。主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统。本病最早由美国Schalk和Hawn报道，临床以患鸡咳嗽、喷嚏和气管啰音的呼吸道症状为主，之后陆续在各国发生，呈世界性分布。能使成鸡的增重和饲料报酬降低，鸡蛋产量、质量和孵化率下降，并直接导致雏鸡死亡、肾脏病变和输卵管永久性退化。近年来，该病的流行呈上升趋势，尤其肾型IB（主要引起肾脏肿大、尿酸盐沉积）已蔓延至全国各养鸡地区，造成了严重经济损失。IB简介IBV的血清型较多， 常见的有Massachusetts、Connecticat、lowa97、lowa609、Hotle、JMK、Clark333、SE17、Florida、Arkanass99和Australian“T”等。IBV基因组核酸RNA复制的不连续机制及RNA聚合酶的不完全校对机制，使得病毒RNA在复制过程中易发生基因点突变、插入、缺失或重组，造成大量IBV变异株的出现，目前世界上已分离到的IB血清型已达30种之多，不同血清型毒株疫苗之间仅有部分或无交叉保护作用，IB的多血清型性为其免疫预防增加了难度。从以下几方面介绍IBV的研究进展：1、基因组结构2、主要结构蛋白及生物学功能3、复制过程4、变异机制5、鉴定和检测1、IBV的基因组结构IBV属于冠状病毒科，是冠状病毒的代表株。其为正链单股RNA病毒，直径90~200nm，是所有RNA病毒中最大的。病毒有囊膜，表面有放射状排列的杆状纤突。IBV是第一个测定了基因组全部序列的冠状病毒，共有27608个核苷酸组成，长27~30kb，5’端有帽子结构，3’端有poly（A）尾，至少有10个明显的ORF，编码分子量6.7~440K的蛋白，现已确定的ORF的定位次序如下：5’ Cap – 1a -1b – S – 3a – 3b – 3c（E）- M – 5a – 5b – N - Poly（A）- 3’，分别编码病毒的结构蛋白和非结构蛋白。IBV被分为6个区域，由小到大分别被命名为mRNA A~F。2、IBV的主要结构蛋白及生物学功能IBV含三种最主要的结构蛋白：纤突蛋白（Spike Glycoprotein，SGP，即S蛋白）、膜蛋白（Membrane Glycoprotein，MGP，即M蛋白）、核衣壳蛋白（Nucleocapsid Protein，NP，即N蛋白），分别由mRNA E、C、A编码，三种结构蛋白的摩尔比为1：6：15，第四种小膜蛋白（sM）与病毒囊膜有关。病毒的血清型、血凝抑制和大多数的中和抗体均由S1蛋白决定和诱导。2.3 核衣壳蛋白（N）核衣壳蛋白是唯一位于病毒内部的结构蛋白，位于囊膜内与基因组RNA紧密结合的核衣壳上，分子量为46kDa，占病毒蛋白总来那个的40%，在整个基因组的进化过程中相对最为保守。N蛋白在病毒复制 、组装中有重要作用。N蛋白与先导RNA序列相互作用有助于病毒mRNA合成和病毒RNA结合形成螺旋状衣壳结构，使之容易装入病毒壳内。N蛋白还是免疫识别相关靶位，在细胞免疫和体液免疫中起重要作用。3、IBV的复制过程IBV的复制主要在感染细胞的胞浆内完成，毒粒通过囊膜上的S糖蛋白与靶细胞膜上的特异受体结合，并吸附在细胞表面，以细胞膜与病毒囊膜融合或内吞的方式进入细胞。3.1 IBV基因组的复制病毒基因组一旦进入细胞，便在胞浆内完成其生物学过程。作为一种正链RNA病毒，IBV进入胞浆后首先是让病毒基因组RNA与细胞核糖体结合，从5’端翻译病毒特异的早期依赖于RNA的RNA聚合酶。mRNA的复制不需要细胞核的功能，而是按照特殊的先导-引物转录模式，该RNA聚合酶使病毒的正链基因组RNA转录出一条全长的互补负链RNA，其5’端有一段Poly（U）序列。然后以负链RNA为模板，通过另外一种依赖RNA的RNA聚合酶进一步转录出新的正链基因组RNA（mRNA F）和一套5个亚基因组mRNA（mRNA E~A）。3.1 IBV基因组的复制先导-引物转录模式（leader-primered transcription）：先导RNA（即先导序列）从负链RNA 3’端转录出来后与模板链（即负链RNA）分离，但继续与RNA聚合酶保持联系。该先导物-聚合酶复合物继续向模板链下游移动，当遇到与先导RNA互补的序列时，以此为识别信号，重新结合模板链，并以先导RNA作为引物，转录出一条亚基因组mRNA。经过上述不同mRNA起始位点的结合，结果得到一套长度递减的mRNA。3.1 IBV基因组的