受精前后卵透明带糖蛋白的生化特性差异.pdfVIP

华 南 理 工 大 学 学报 （自然 科 学 版 ） 第31 卷第11 期 JournaI of South China University of TechnoIogy VoI. 31 No. 11 2003 年 11 月 （NaturaI Science Edition ） November 2003 文章编号：1000-565X（2003 ）11-0069-04 受精前后卵透明带糖蛋白的生化特性差异! 曹佐武 （暨南大学 生殖免疫研究中心，广东广州510632 ） 摘 要：探讨受精后卵透明带糖蛋白的生化特性变化. 用SDS分析未受精卵和2- 细胞胚胎的透明带成分的差异. 研究结果表明，受精前后卵透明带的主要带型相似，但2- 细胞胚胎透明带在还原电泳中有一条特异的小肽，分子质量在15 000 ~ 30 000 之间，约为 22 000 . 进一步用HPLC 分析两种样品的0-侧糖链的不同，分析显示，两种样品的0-糖链 中有3 种单糖基的保留时间值很相似，但有些寡糖基明显不同. 小鼠透明带精子受体失活 的分子机制主要在于0-寡糖链的修饰，0-单糖与精子受体失活没有明显的关系. 关键词：透明带；0-糖链；糖蛋白；生化特性 中图分类号：O 26 文献标识码：A 受精是精子与卵细胞特异性识别并融合形成受 是作为精子受体的ZP3 糖链被修饰造成的. 但是带 精卵的过程. 精子与卵细胞识别的关键在于精子膜 反应中ZP3 被如何修饰呢？目前尚无明确的答案. 蛋白与卵透明带之间的结构特异性，是一种受体与 文中通过比较未受精卵和2-细胞期胚胎的透明带 配体的特异性结合. 成分差异来探讨带反应对透明带的修饰. 透明带是卵细胞膜外的一层特殊的非细胞结 构. 小鼠和其它研究过的哺乳类的透明带都是由少 1 材料和方法 数几种糖蛋白组成，小鼠透明带糖蛋白成分有3 种， 1. 1 主要材料 分别命名为ZP1、ZP2 和ZP3［1］. 研究显示，小鼠透明 孕马血清促腺激素（PMSG ）购自长春军事兽医 带糖蛋白ZP3 在受精中充当初级精子受体，ZP2 充 研究所；人绒毛膜促腺激素（HCG ），南京大学制药 当次级精子受体. ZP3 上的精子受体活性归因于糖 ［2 ，3 ］ 厂生产；透明质酸酶、牛血清白蛋白质均为Sigma 产 蛋白上特异的0-糖链 . 品；昆明小鼠购自暨南大学实验动物所. 受精后精子激发卵细胞发生一系列变化，其中 1. 2 促排卵 皮质颗粒释放多种水解酶并排出卵细胞外，这些酶 18 ~ 22g 的雌性昆明小鼠，腹腔注射5 !moI/ min 渗透到透明带中使透明带结构发生变化，阻止后来 的PMSG，48 h 后腹腔注射5 !moI/ min 的HCG. 注射 的精子结合和穿透透明带发生多精子受精. ［4 ］ HCG 后的特定时间取小鼠输卵管，在生理溶液M2 中 研究表明 ，受精后透明带糖蛋白ZP1 二聚体