罗汉松提取物的有效性评价和在化妆品中的应用研究.pdfVIP

罗汉松提取物的有效性评价和在化妆品中的应用 中井隆人，西浦英树，田中克昌 (日本科玛株式会社) 摘要：我们使用高野罗汉松提取物进行了各种试验并对其有效性进行了评价。首先，在抗氧化性能 评价方面，对DPPH自由基消除作用、SOD活性作用、脂质过氧化抑制作用进行了验证，发现到高野罗汉松 化刺激，预先用高野罗汉松提取物处理过的细胞会减轻氧化刺激所带米的细胞生存牢低下。在此，对细胞 内抗氧化物质glutathione进行调奄发现，因浓度变化会促进glutathione产生。 根据以卜内容，高野罗汉松提取物具有消除自由基效果和提高细胞所持有的生态舫御机能，通过这2种 发现可以看出其含有抗氧化作用。 关键词： 高野罗汉松；抗氧化；glutathione l序论 口本固有品种的高野罗汉松(Sciadopitys 并作为悠仁亲王之印emperorsymbolmark)受到喜爱。在一科一属一种的植物分类学．卜高野罗汉松也 是一种奇特存在的植物，从出土的化石判明，在数百万年前曾经遍布北半球全区域。但是，随着气候寒冷 化其分布地域越米越狭窄，只有在位于因黑潮海流比较温暖的口本唯一生存至今。高野罗汉松自古作为 建筑材料、船舶材料、洗澡桶等加工木材被人们使用。并且以其抗菌作用而出名，但对其它的有效性没 有进行过详细的调查。 众所J舂j知当紫外线照射到皮肤时，皮肤内会产生活性氧，其所发生的超氧化被SOD不均化为过氧化氯， radical)。这些活性氧种对细胞会引起DNA氧化障碍．蛋白质变性等，成 进一步产生为羟游离基(Hydroxyl 为皱纹和黑斑、肌理的消失、弹性低下等皮肤问题的原因。凶此，对生物体所产生的活性氧来说，各种抗 氧化酶具备的生物防御机能以及如何防止在生物体内的氧化障碍则成为如何防治皮肤问题的关键”z)’。 因此在这里，通过使用高野罗汉松进行各种各样的评价，应用在化妆品中的可能性进行了调查。 2抗氧化性能评价 2．1 DPPH自由基消除作用 定，计算自由基消除率(图1)。 2．2 SOD样活性作用 使用SODAssayKit-WST(同仁化学株式会社)，根据WST法进行测试(图2)。 2．3亚油酸自动氧化抑制作用 将样品加入用磷酸缓冲液稀释后的亚油酸液，在40C黑暗下静置2剧过后，用硫氰化铁方法对样品 液体的氧化程度进行测试(图3)。 无论那种试验都确认到了与浓度相关的抗氧化作用，明确到高野罗汉松提取物有着很强的抗氧化效 果。 3细胞氧化障碍防御作用 其次、在细胞学方面对高野罗汉松提取物的抗氧化作用进行了评价。 197 的MEM培养基进行接种，在37℃、5％c02条件下培养3个小时。其后，边交换培养基边添加稀释成各种浓 uM 度的样品，20小时后一边进行培养基交换一边将0．5mM的t-BuOOH或者75H：O：暴露3个小时进行 细胞障碍诱导。其后，使用neutral red进行活细胞染色，计算出细胞障碍未诱导的细胞生存率为100％ (图4·5)。因为高野罗汉松提取物本身有抗氧化作用，为了在氧化障碍诱导时的培养液中不残留高野罗 汉松提取物，事先进行了充分的清洗。 结果表明，事先经过高野罗汉松提取物处理的细胞在细胞氧化障碍诱导后的细胞生存率与无添加的 相比占优势增加。这个说明了高野罗汉松提取物对氧化障碍有着防御效果。 4 glutathione产生促进作用 在此，对细胞内抗氧化物质的一种glutathione验证了高野罗汉松提取物的效果。 的MEM培养基进行接种，在37℃、5％coz条件下进行24小时培养，其后在交换培养基的同时添加样品。在 24小时后对细胞进行回收，弄碎后，对细胞内的glutathione量使用total 出(图5)。 使用高野罗汉松提取物进行处理后的细胞、随着浓度提高具有有利增加glutathione量的现象，很明 确，高野罗汉松提取物有着促进glutathione产生的作用。 5总结 此次，在我们通过一系列的评价结果，判明高野罗汉松提取物有着抗氧化