花生脂肪酶基因的克隆分析及表达研讨.pdfVIP

山东 农 业 科 学 2013，45(1)：1～8 ShandongAgriculturalSciences 花生脂肪酶基因的克隆分析及表达研究 肖 寒 ，夏 晗。，李 军 ，周凤珏 ，刘学英。，万书波 ，王兴军 (1．广西大学农学院，广西 南宁 530003； 2．山东省农业科学院高新技术研究中心／山东省作物遗传育种与生态生理重点实验室 ，山东 济南 250100； 3．山东科技大学泰安校区，山东 泰安 271019) 摘 要：脂肪酶是生物脂肪代谢过程中的重要酶系 ，在酶工程中具有重要应用价值。本研究利用花生未 成熟种子的eDNA文库，克隆了3种脂肪酶基因。序列分析表明，花生3种脂肪酶均具有保守的氨基酸序列 和催化活性位点，分属不同的脂肪酶家族。利用半定量RT—PCR对花生3种脂肪酶进行表达研究表明，它们 在各组织中的表达模式各不相同，其中AhLipase2在种子萌发时期的子叶中表达量高，可能起到分解储藏油 脂，为幼苗生长提供营养的作用。 关键词 ：花生；脂肪酶；基因克隆；表达分析 中图分类号：Q785 文献标识号：A 文章编号：1001—4942(2013)Ol—OOOl一08 CloningandExpressionAnalysisofLipaseGenes inArachishypogaeaL． XiaoHan ，XiaHan ，LiJun ，ZhouFengJue，LiuXueYing。，WanShuBo WangXingJun ’ ， (1．AgronomyCollegeofGuangxiUnivemity，Nanning530003，China； 2．High ·TechResearchCenter，ShandongAcademyofagriculturalSciences／ShandongProvincial KeyLaboratoryofCropGeneticImprvoement，EcologyandPhysiology，nnn250100，China； 3．ShandongUniversityofScienceandTechnologyatTaian，Taian271019，China) Abstract Lipaseisanimportantenzymeinfattymetabolism．Ithasgreatapplicationvalueinenzyme engineering．ThreelipasegeneswereclonedfromtheeDNAlibraryofpeanut(ArachishypogaeaL．)imma· tureseeds．Theresultsshowedthatthetypical aminoacidsequencesandcatalyticsitesofpeanutlipaseswere highlyconserved，andthesethreepeanutlipasesbelongedtodifferentlipasefamilies．Thesemi—quantitative PCR analysisresultsindicatedthattheexpressionpatternsoftheselipasesvaried indifferenttissuesandor- gans．TheAhlipase2expressedhighlyincotyledonofgerminatingseedssuggestedthepossiblerolesofAhl- ipa~e2 intriacylglycerolhydrolysisduringseedgermination． Keywords ArachishypogaeaL．；Lipase；Geneclone；Expressionpattern 三酰甘油脂肪酶广泛存在于生物